P19细胞过表达外源Necdin对其细胞增殖的影响

来源 :生物技术通报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：zqnihao920

【摘要】

：

构建PcDNA3.1/necdin 真核表达载体并制备稳定过表达Necdin 的P19 细胞克隆，检测稳定过表达Necdin 对P19 细胞增殖的影响。从正常培养P19 细胞提取RNA 反转录成cDNA，以此作为P

【作者】

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惠焕动刘勇刘少君

【机构】

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中南大学,军事医学科学院基础医学研究所

【出处】

：

生物技术通报

【发表日期】

：

2013年10期

【关键词】

：

NECDIN 载体构建细胞转染 P19细胞过表达细胞增殖 Necdin Vector construction Cell transfection

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构建PcDNA3.1/necdin 真核表达载体并制备稳定过表达Necdin 的P19 细胞克隆，检测稳定过表达Necdin 对P19 细胞增殖的影响。从正常培养P19 细胞提取RNA 反转录成cDNA，以此作为PCR 模板扩增得到necdin 目的基因，插入PcDNA3.1 载体的EcoR Ⅰ 和Xho Ⅰ 位点；脂质体法将构建的真核表达载体PcDNA3.1/necdin 转染P19 细胞，G418 筛选后挑取细胞单克隆， Western 印迹鉴定细胞单克隆中Necdin 的表达水平。CCK-8 法检

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