地芽孢杆菌Geobacillus sp.GXS1α-淀粉酶的饱和突变及酶学性质研究

• 作 者: 薛蓓 裴建新 王治宾 罗章 韦宇拓
• 机 构: 西藏农牧学院食品科学学院,广西科学院国家非粮生物质能源工程技术研究中心,成都蓉生药业有限责任公司,广西大学微生物及植物遗传工程教育部重点实验室
• 出 处: 生物技术通报
• 发表日期: 2013年10期
• 关键词: 地芽孢杆菌 Α-淀粉酶 酶学性质 饱和突变 GeobaciUus Alpha-amylase Characterization Site-saturati

采用半理性设计方法，在网站Geno3D 上以PDB 数据库中B. stearothermophilus 麦芽糖淀粉酶（BSMA） 的三维结构为模板，对AMY（α-淀粉酶）进行三维结构同源建模（二者氨基酸的同源性为33％）。比较同源建模预测的3D 结构和模板BSMA 的3D 结构关键位点，在此基础上通过计算机辅助设计软件ProSa2003， 根据能量变化确定了AMY 三个饱和突变位点：D192 、E221 和D289 。利用兼并引物对AMY 的假定活性中心位点D192 、E221 和D289 的氨基酸分别进