利用RNA干扰技术抑制水稻淀粉极限糊精酶基因表达

• 作 者: 黄冰艳 李忠谊 吉万全 海燕 Fleming J Morel
• 机 构: 河南省农业科学院生物技术研究所、河南省农作物新品种重点实验室,PlantIndustry,西北农林科技大学农学院
• 出 处: 农业生物技术学报
• 发表日期: 2007年1期
• 关键词: 淀粉生物合成 淀粉脱支酶 极限糊精酶 RNA干扰(RNAI) 发夹RNA(hpRNA) starch biosynthesis debranching enzy
• 基金项目: 基金项目：国家留学基金（No.21841046）和河南省杰出人才创新基金（No.0121000700）资助.致谢：特别感谢澳大利亚联邦科学与工业研究组织植物研究所Behjat Kosar-Hashemi博士和Jody Higgins博士对研究工作的帮助,并感谢CSIR0实验室Mark Cmiel、Ella Whitelaw、Muhuntham Rajaratmam以及汪宏对实验工作的支持.同时感谢

构建了含极限糊精酶基因片段反向重复结构的RNAi载体，抑制水稻籽粒中极限糊精酶基因表达获得了极限糊精酶基因功能缺失突变体。经酶切及序列测定证实，成功地构建了胚乳特异表达启动子启动的水稻极限糊精酶基因反向重复结构RNAi载体；通过根癌农杆菌（Agrobactcrium tumefaciens）介导水稻（Oryzasativa sp．japonica）转化，经PCR及Southern杂交检测，获得28个水稻转基因再生株系；以极限糊精酶抗体对转基因株系胚乳发育期籽粒蛋白质进行Western杂交，并经SDS-PA