【摘 要】
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以ConA刺激的犬外周血淋巴细胞总RNA为模板,通过RT-PCR方法扩增出犬IL-2成熟蛋白基因,将目的片段连接到pMD18-T载体,测序结果显示,扩增片段与GenBank上的序列一致.然后将目的
【机 构】
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公安部南京警犬研究所,农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室南京农业大学动物医学院
【基金项目】
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公安部C类项目（No.20049729501）资助.
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以ConA刺激的犬外周血淋巴细胞总RNA为模板,通过RT-PCR方法扩增出犬IL-2成熟蛋白基因,将目的片段连接到pMD18-T载体,测序结果显示,扩增片段与GenBank上的序列一致.然后将目的片段连接到酵母表达载体pPICZa-A上,得到重组酵母犬IL-2表达载体pPICZaA-CaIL-2,经Sac Ⅰ酶切线性化后电转化导入毕赤酵母菌株（Pichia pastoris）X-33.PCR方法筛选重组酵母菌,甲醇诱导表达,SDS-PAGE结果显示,表达上清中有大小约20 kD的目的条带,比实际分子量略大
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