腺病毒递送BMI-1shRNA

• 作 者: 陈振萍 陈晓梨 郑杰
• 机 构: 首都医科大学附属北京儿童医院血液病中心,中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院、实验血液学国家重点实验室
• 出 处: 中国实验血液学杂志
• 发表日期: 2009年5期
• 关键词: 腺病毒载体 短发夹RNA K562细胞系 adenovirus vector short hairpin RNA K562 cell line

近年来发展了一些质粒载体介导shRNA的转录，然后在细胞酶的作用下加工成功能性的siRNAs。虽然这些载体较化学合成的siRNA有更多的优点，但仍存在相当多的缺点，如转染效率低和不能在体内使用。本研究建立一种没有上述缺点的腺病毒递送BmihRNAs系统，设计靶向人Bmi—1的载体。以pAdTrackCMV质粒为模板扩增CMV—GFP表达盒，从pGE1BMIhRNA质粒上酶切下U6-BMI-1shRNA表达盒，克隆它们入穿梭质粒pShuttle中，然后与pAdEasy-1质粒基因重组产生腺病毒质粒pAd—B