【摘 要】
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以高粱幼苗为材料,利用1%的纤维素酶Cellulose R10和0.75%的果胶酶Macerozyme R10处理高粱幼茎,对比不同的酶解时间,发现酶解7h原生质体浓度最高、质量最佳。以经过氯化铯密
【机 构】
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贵州大学农学院,国家小麦改良中心贵州分中心
【基金项目】
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贵州省科技厅农业公关项目(黔科合支撑[2019]2408号);贵州省科技厅的工程中心建设计划项目(黔科合农G字[2012]4004号);贵州省高层次留学人才创新创业择优资助项目([2018]02号);国家科技支撑计划项目(2014 BAD 07 B 02);贵州大学引进人才科研基金(贵大人基合字[2017]54号)
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以高粱幼苗为材料,利用1%的纤维素酶Cellulose R10和0.75%的果胶酶Macerozyme R10处理高粱幼茎,对比不同的酶解时间,发现酶解7h原生质体浓度最高、质量最佳。以经过氯化铯密度梯度离心法获得的高纯度质粒对获得的原生质体进行转化,用激光共聚焦进行荧光观察,结果显示,GFP和YFP在全细胞表达。本研究首次建立了高粱以高粱幼茎为材料的原生质体制备及转化体系,其方法简单、高效,可以用于高粱基因功能研究。
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