用万能引物PCR法从YAC中分离制备荧光原位杂交探针的研究

• 作 者: 史庆华 黄浩杰
• 机 构: 南京师范大学生物系,复旦大学遗传学研究所
• 出 处: 遗传学报
• 发表日期: 1998年5期
• 关键词: 万能引物(UP) PCR YAC FISH Universal primer (UP) PCR Yeast artificial chromosome (Y

报道了一种从微量且未知碱基顺序的ＹＡＣ ＤＮＡ中制备ＦＩＳＨ探针的新方法－万能引物ＰＣＲ（ＵＰ ＰＣＲ），即把复性后的ＵＰ－Ｌｉｎｋｅｒ连接于ＰＣＧＥ分离后经ＡｌｕⅠ酶切的ＹＡＣ ＤＮＡ上，再用ＵＰ对其进行ＰＣＲ扩增和标记。由于Ａｌｕ Ｉ的广谱性和ＵＰ与Ｌｉｎｋｅｒ长度不同等，使该法能根据ＰＣＲ效率调节扩增产物的广泛性向特异性的转变，且产物能覆盖ＹＡＣ嵌入ＤＮＡ的全长。此法制备的人２１号染色体ＦＩ