【摘 要】
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目的:探讨抗纤益心方干预自身免疫损伤小鼠免疫调节的作用机制,及其与辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)细胞平衡的关系.方法:将60只SPF级BALB/c健康8周龄雄性小鼠按1:5的比例随机分为正常组和造模组,在第0,7,28天于造模组小鼠腹股沟、腋下、背部多处皮下注射猪心肌肌球蛋白乳化液0.2 mL(含猪心肌肌球蛋白0.1 mg)以制备心肌免疫损伤小鼠模型.将造模成功的小鼠随机分为模型组,抗纤益心方组(KYP),缬沙坦组(Valsartan),抗纤益心方组给予抗纤益心方20.4 g·kg
【机 构】
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河南中医药大学,郑州450046;新密市中医院,河南新密452370;河南省中医院,郑州450002
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目的:探讨抗纤益心方干预自身免疫损伤小鼠免疫调节的作用机制,及其与辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)细胞平衡的关系.方法:将60只SPF级BALB/c健康8周龄雄性小鼠按1:5的比例随机分为正常组和造模组,在第0,7,28天于造模组小鼠腹股沟、腋下、背部多处皮下注射猪心肌肌球蛋白乳化液0.2 mL(含猪心肌肌球蛋白0.1 mg)以制备心肌免疫损伤小鼠模型.将造模成功的小鼠随机分为模型组,抗纤益心方组(KYP),缬沙坦组(Valsartan),抗纤益心方组给予抗纤益心方20.4 g·kg-1·d-1灌胃,缬沙坦组给予缬沙坦12 mg·kg-1·d-1灌胃,正常组和模型组给予同计算量的生理盐水灌胃,连续灌胃4周后取材,苏木素-伊红(HE)染色、马松(Masson)染色检测心肌组织中病理损伤情况,酶联免疫吸附法检测小鼠血清中B型钠尿肽(BNP),抗心肌抗体,白细胞介素-17(IL-17)和白细胞介素-10(IL-10)的表达,流式细胞术检测脾脏Th17,Treg细胞的表达水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠心肌组织B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax),Bcl-2蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测小鼠脾脏转录因子维A酸相关孤独受体γt(RORγt),叉头框蛋白P3 (FoxP3)mRNA表达.结果:与正常组比较,模型组小鼠心肌病理损伤增加,血清BNP,抗心肌抗体,IL-17升高,IL-10降低(P＜0.05),脾脏Th17细胞表达水平升高,Treg细胞的表达水平降低(P＜0.05),心肌组织Bax蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达降低(P＜0.05),Bax/Bcl-2值升高,脾脏RORγt mRNA表达升高,FoxP3mRNA表达降低,RORγt/FoxP3升高(p＜0.05);与模型组比较,抗纤益心方组及缬沙坦组心肌病理损伤减轻,血清BNP,抗心肌抗体,IL-17降低,IL-10升高(P＜0.05),脾脏Th17细胞表达水平降低,Treg细胞的表达水平升高(P＜0.05),心肌组织Bax蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达升高(P＜0.05),Bax/Bcl-2降低,脾脏RORγt mRNA表达降低,FoxP3 mRNA表达升高,RORγt/FoxP3值降低(P＜0.05).结论:抗纤益心方可能通过调节Th 17/Treg细胞平衡改善心肌免疫损伤.
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