天蓝苜蓿花药愈伤组织诱导及再生体系的建立

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为获得天蓝苜蓿单倍体再生植株,本研究以野生天蓝苜蓿花药为外植体,采用正交设计L16(44)筛选适宜天蓝苜蓿愈伤组织诱导培养基,比较不同基本培养基及生长调节剂组合筛选适宜的分化培养基,并用1/3MS、1/2MS和MS添加不同浓度的NAA研究不定生根.结果表明:天蓝苜蓿现蕾15~25 d的花药其愈伤组织诱导效果最好,高达60.5%.4 ℃低温预处理2~4 d有利于愈伤组织诱导,诱导率达77.2%.适宜花药愈伤组织诱导的培养基为NB+2,4-D 1.0 mg/L+NAA0.5 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+TDZ 1.0 mg/L,诱导率达78.5%.比较不同基本培养及生长调节剂的不同组合发现,NB培养基愈伤组织分化效果优于B5和MS,NB+NAA 0.5 mg/L+6-BA 2.0 mg/L适宜愈伤组织的分化,分化率为66.3%.不定芽在1/3MS+NAA0.5 mg/L中培养,生根率最高,为86.55%.本研究建立了天蓝苜蓿花药培养再生体系,获得了单倍体植株,为天蓝苜蓿的育种实践及基因组学研究提供基础材料.
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