【摘 要】
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目的 探讨超声联合微泡造影剂SonoVue增效脂质体介导的Survivin基因体外转染脐血来源树突状细胞的方法.方法 体外培养扩增脐血来源的树突状细胞,在不同强度超声波和不同剂量
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目的 探讨超声联合微泡造影剂SonoVue增效脂质体介导的Survivin基因体外转染脐血来源树突状细胞的方法.方法 体外培养扩增脐血来源的树突状细胞,在不同强度超声波和不同剂量造影剂SonoVue作用下,观察脂质体介导的凋亡抑制因子Survivin基因与绿色荧光蛋白(GFP)共表达的融合重组质粒pEGFP-C1-Survivin在树突状细胞的定向转染.激光共聚焦显微镜定性观察细胞转化情况,流式细胞仪观察树突状细胞的表型变化及定量观察细胞转化效率,台盼蓝染色检测超声作用于细胞的安全性.结果 脐血来源的树突状细胞以超声机械指数 1.0、作用时间60 s基因转染时对细胞比较安全,SonoVue浓度为10%时达到最佳的基因转染效率.流式细胞仪检测转染前后树突状细胞的表型无明显变化,平均转化阳性率可达(51.4±2.5)%,高于单纯脂质体转染的效率(P＜0.05).结论 超声联合微泡造影剂SonoVue可提高脂质体介导的Survivin基因体外转染树突状细胞的效率,为肿瘤的基因及免疫治疗研究提供了新的思路.
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