登革2型43株病毒包膜蛋白E基因的聚合酶链反应扩增

来源 :中华实验和临床病毒学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kaiserking
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以我国登革2型43株病毒RNA为模板,采用逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR)扩增E基因片段。拟扩增的E基因片段始于登革病毒编码序列5′端的1 036bp,止于3′端的2 304bp,其间含有1个Hind Ⅲ酶切位点,3′端有1个Smal位点,5′端有1个EcoR Ⅰ位点。建立了扩增大片段的实验条件并制备出了大于1 200bp以上的片段。该片段与标准分子量对比为1 292bp左右,经Hind Ⅲ酶切,出现781bp和511bp2个片段,用Southern blot和光敏生物素标记核酸探针证实制备出的1 292bp片段为E基因片段,此片段可直接用于克隆表达。

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