解毒酶基因的克隆及在大肠杆菌中的融合表达

• 作 者: 黄菁 乔传令 李瑄 邢建民
• 机 构: 中国科学院动物研究所
• 出 处: 遗传学报
• 发表日期: 2001年6期
• 关键词: 酯酶B1 克隆 表达 解毒酶 农药 昆虫 融合表达 esterase B1 cloning expression degradation pestici
• 基金项目: 国家高技术研究发展计划(863计划)，中国科学院科研项目，中国科学院知识创新工程项目

用RT朠CR克隆了酯酶B1 5′端B1(a),并对其进行了序列测定,将其与3′端B1(b)一起连接到pET?28a中,构建了完整融合表达载体pET朎STB1.转化大肠杆菌BL21,在IPTG诱导下,经过12小时,酯酶B1在大肠杆菌内的融合表达达到27%.通过纯化获得1条带的重组蛋白.用粗酶对马拉硫磷的降解显示,该解毒酶在15分钟即降解22.1%,具有较高降解有机磷酸酯类农药的能力.为利用真核生物的自然资源进行农药污染的生物治理等提供了新途径.