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摘要 [目的] 研究茄叶斑鸠菊中倍半萜类化学成分种类，并鉴定其结构。[方法] 利用硅胶色谱、大孔树脂层析、Sephadex LH-20和ODS反相层析等方法，对茄叶斑鸠菊提取物进行分离纯化，并利用现代波谱技术鉴定化合物的结构。[结果]从茄叶斑鸠菊中分离得到了6种倍半萜类化学成分，分别鉴定为Incaspitolide D、Ineupatolide、Incaspitolide A、 8β-angelyloxy-3β，4β，14-trihydroxy-5αH，6βH，7αH-guai-1（10），11（13）-diene-6，12-olide、caryolane-1，9β-diol、8β-angelyloxy-4α-hydroxy-14-oxo-5αH，6βH，7αH-guai-2，10（14），11（13）-triene-6，12-olide。[结论]6种化合物均为首次从茄叶斑鸠菊中分离得到，为茄叶斑鸠菊活性成分的开发利用奠定了基础。
关键词 斑鸠菊属；茄叶斑鸠菊；化学成分；倍半萜类；分离纯化
中圖分类号 S567；R284.1 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2018）02-0160-03
Abstract [Objective] The research aimed to study the chemical components of sesquiterpenoids from Vernonia solanifolia and to identify its structure.[Method]The components were isolated and purified by silica gel chromatography， macroporous resin chromatography， Sephadex LH20 and ODS reverse phase chromatography and other methods， the Vernonia solanifolia extract was isolated and purified， and the structure of the compound was identified by modern spectroscopic techniques.[Result]Six sesquiterpenoids were isolated from Vernonia solanifolia， and their structure were identified as Incaspitolide D；Ineupatolide；Incaspitolide A；8βangelyloxy3β，4β，14trihydroxy5αH，6βH，7αHguai1（10），11（13）diene6，12olide；caryolane1，9βdiol；8βangelyloxy4αhydroxy14oxo5αH，6βH，7αHguai2，10（14），11 （13）triene6，12olide.[Conclusion]Compounds 1-6 were isolated from Vernonia solanifolia for the first time， which laid the foundation for the development and utilization of the active ingredients of Vernonia solanifolia.
Key words Vernonia；Vernonia solanifolia；Chemical components；Sesquiterpenoids；Separation and purification
斑鸠菊属植物约1 000种，主产热带地区。我国有30余种，分布在西南至东南部和台湾[1]。我国民间常将该属植物作为草药入药，全草药用，发表散寒，清热止泻，治急性肠胃炎、风热感冒、头痛、疟疾等症[2]；美洲该属植物被用作驱虫、抗疟植物药，疗效显著。国内外学者曾对该属植物的化学成分有较多研究，发现主要成分为倍半萜类、三萜、黄酮、甾体、挥发油等。这些成分展现了多方面的药理活性，如抗肿瘤、抗真菌、抗疟等[3]。茄叶斑鸠菊（Vernonia solanifolia）是菊科斑鸠菊属的植物，又名白花毛桃、咸虾菊、凉藤、过山龙等，全草入药，治腹痛、肠炎、痧气等症。史资等[4]对茄叶斑鸠菊提取物活性进行了评价，发现该植物全草甲醇提取物具有较强的抗肿瘤活性和抗氧化活性。但有关茄叶斑鸠菊的化学成分研究较少，为了寻找其中的药效物质基础，合理开发利用这一药用植物，笔者对茄叶斑鸠菊甲醇提取物的化学成分进行了研究。
1 材料与方法
1.1 试验材料
茄叶斑鸠菊全草采集于中国福建，由福建省亚热带植物研究所陈华良博士鉴定为Vernonia solanifolia，药材标本保存于武汉轻工大学天然产物资源开发与利用研究室。
1.2 仪器与试剂 Bruker AV 400型核磁共振波谱仪（瑞士布鲁克公司）；十万分之一分析天平（日本岛津公司，AUWl20D）；数显恒温水浴锅（常州丹瑞实验仪器设备有限公司，HH-D4）；柱层析硅胶（100～200目，青岛海洋化工厂）；MCI GEL CHP 20P（日本三菱化学公司）；D101大孔吸附树脂（天津兴南允能高分子技术有限公司）；ODS中压色谱柱填料（日本YMC公司）；Sephadex LH-20（Pharmacia 公司）；化学试剂均为分析纯（国药集团化学试剂有限公司）。
1.3 试验方法 茄叶斑鸠菊全草5 kg，粉碎，以95%乙醇加热回流提取3次，将提取液合并浓缩至无醇味，加水混悬，用乙酸乙酯萃取，得乙酸乙酯部位浸膏200 g。乙酸乙酯部位浸膏硅胶拌样，干法上柱，采用硅胶柱层析，石油醚-丙酮梯度洗脱，通过TLC检测合并后得到4个组分（Fr Ⅰ～Ⅳ），Fr Ⅱ（40 g）经D101大孔吸附树脂吸附，乙醇梯度洗脱，得Fr 1～4部分，其中Fr 2经反复硅胶柱层析、反相ODS柱层析（甲醇-水梯度洗脱）和凝胶柱层析（甲醇洗脱），进行分离纯化，得到3个化合物，分别为化合物1（8.6 mg）、化合物2（10.2 mg）、化合物4（12.8 mg）。Fr 3经过MCI树脂（甲醇-水梯度洗脱），硅胶柱层析（氯仿-甲醇梯度洗脱）、反相柱层析（甲醇-水梯度洗脱）以及凝胶柱层析（甲醇洗脱）进行分离纯化，得化合物3（14.1 mg）、化合物5（18.4 mg）和化合物6（16.1 mg）。 2 结果与分析
试验分离得到的6种化合物的结构见图1，化合物1～6经过核磁共振波谱技术测定，并与参考文献进行对比，发现6种化合物均为倍半萜类化合物，且均为首次从茄叶斑鸠菊中分离得到。
2.1 化合物1
3 结论
该研究通过系统分离纯化，从茄叶斑鸠菊全草提取物中分离鉴定了6种倍半萜类化合物，经结构鉴定分别为Incaspitolide D、Ineupatolide、Incaspitolide A、8β-angelyloxy-3β，4β，14-trihydroxy-5αH，6βH，7αH-guai-1（10），11（13）-diene-6，12-olide、caryolane-1，9β-diol、8β-angelyloxy-4α-hydroxy-14-oxo-5αH，6βH，7αH-guai-2，10（14），11（13）-triene-6，12-olide。经检索，6种化合物均为首次从该植物中分离得到，该类化合物具有显著的抗肿瘤、抗HIV、抗病毒、免疫调节、抗菌、抗炎等活性[9-10]。
参考文献
[1] 中国科学院《中国植物志》编辑委员会.中国植物志[M].北京：科学出版社，1985.
[2] 刘清华，杨峻山，索茂荣.斑鸠菊属的倍半萜内酯类及甾体皂苷类化学成分及药理活性研究进展[J].中国中药杂志，2007，32（1）：10-17.
[3] 孙力，巴玉兰，于鲁海，等.斑鸠菊属植物药理活性研究进展[J].新疆中医药，2009，27（6）：82-85.
[4] 史资，陈新，刘梁.DPPH法测定茄叶斑鸠菊不同极性部位的抗氧化活性 [J].食品研究与开发，2017，38（9）：19-21.
[5] BOHLMANN F，SINGH P，JAKUPOVIC J.Further ineupatorolidelike germacranolides from Inula cuspidate[J].Phytochemistry，1982，21（1）：157-160.
[6] BARUAH R N，SHARMA R P，THYAGARAJAN G.Unusual gennacranolides from Inula eupatorioides[J]. J Org Chem，1980，45（24）：4838-4843.
[7] YANG S P，HUO J，WANG Y，et al.Cytotoxic sesquiterpenoids from Eupatorium chinense[J].Journal of natural products，2004，67（4）：638-643.
[8] 王蕾，王雙燕，吴兴德，等.翠柏的化学成分研究.[J].昆明医科大学学报，2013，34（7）：8-11.
[9] ROOS G，PRAWAT H，WALTER C U，et al.New sesquiterpene lactones with antibacterial activity from Verninia fastigiata[J].Planta Med，1998，64：673-674.
[10] RUSSELL B，WILLIAMS A N，CARLA S，et a1.Cytotoxic sesquiterpene lactones from Vernonia pachyclada from the Madagascar rainforest [J].J Nat Prod，2005，68（9）：1371-1374.
关键词 斑鸠菊属；茄叶斑鸠菊；化学成分；倍半萜类；分离纯化
中圖分类号 S567；R284.1 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2018）02-0160-03
Abstract [Objective] The research aimed to study the chemical components of sesquiterpenoids from Vernonia solanifolia and to identify its structure.[Method]The components were isolated and purified by silica gel chromatography， macroporous resin chromatography， Sephadex LH20 and ODS reverse phase chromatography and other methods， the Vernonia solanifolia extract was isolated and purified， and the structure of the compound was identified by modern spectroscopic techniques.[Result]Six sesquiterpenoids were isolated from Vernonia solanifolia， and their structure were identified as Incaspitolide D；Ineupatolide；Incaspitolide A；8βangelyloxy3β，4β，14trihydroxy5αH，6βH，7αHguai1（10），11（13）diene6，12olide；caryolane1，9βdiol；8βangelyloxy4αhydroxy14oxo5αH，6βH，7αHguai2，10（14），11 （13）triene6，12olide.[Conclusion]Compounds 1-6 were isolated from Vernonia solanifolia for the first time， which laid the foundation for the development and utilization of the active ingredients of Vernonia solanifolia.
Key words Vernonia；Vernonia solanifolia；Chemical components；Sesquiterpenoids；Separation and purification
斑鸠菊属植物约1 000种，主产热带地区。我国有30余种，分布在西南至东南部和台湾[1]。我国民间常将该属植物作为草药入药，全草药用，发表散寒，清热止泻，治急性肠胃炎、风热感冒、头痛、疟疾等症[2]；美洲该属植物被用作驱虫、抗疟植物药，疗效显著。国内外学者曾对该属植物的化学成分有较多研究，发现主要成分为倍半萜类、三萜、黄酮、甾体、挥发油等。这些成分展现了多方面的药理活性，如抗肿瘤、抗真菌、抗疟等[3]。茄叶斑鸠菊（Vernonia solanifolia）是菊科斑鸠菊属的植物，又名白花毛桃、咸虾菊、凉藤、过山龙等，全草入药，治腹痛、肠炎、痧气等症。史资等[4]对茄叶斑鸠菊提取物活性进行了评价，发现该植物全草甲醇提取物具有较强的抗肿瘤活性和抗氧化活性。但有关茄叶斑鸠菊的化学成分研究较少，为了寻找其中的药效物质基础，合理开发利用这一药用植物，笔者对茄叶斑鸠菊甲醇提取物的化学成分进行了研究。
1 材料与方法
1.1 试验材料
茄叶斑鸠菊全草采集于中国福建，由福建省亚热带植物研究所陈华良博士鉴定为Vernonia solanifolia，药材标本保存于武汉轻工大学天然产物资源开发与利用研究室。
1.2 仪器与试剂 Bruker AV 400型核磁共振波谱仪（瑞士布鲁克公司）；十万分之一分析天平（日本岛津公司，AUWl20D）；数显恒温水浴锅（常州丹瑞实验仪器设备有限公司，HH-D4）；柱层析硅胶（100～200目，青岛海洋化工厂）；MCI GEL CHP 20P（日本三菱化学公司）；D101大孔吸附树脂（天津兴南允能高分子技术有限公司）；ODS中压色谱柱填料（日本YMC公司）；Sephadex LH-20（Pharmacia 公司）；化学试剂均为分析纯（国药集团化学试剂有限公司）。
1.3 试验方法 茄叶斑鸠菊全草5 kg，粉碎，以95%乙醇加热回流提取3次，将提取液合并浓缩至无醇味，加水混悬，用乙酸乙酯萃取，得乙酸乙酯部位浸膏200 g。乙酸乙酯部位浸膏硅胶拌样，干法上柱，采用硅胶柱层析，石油醚-丙酮梯度洗脱，通过TLC检测合并后得到4个组分（Fr Ⅰ～Ⅳ），Fr Ⅱ（40 g）经D101大孔吸附树脂吸附，乙醇梯度洗脱，得Fr 1～4部分，其中Fr 2经反复硅胶柱层析、反相ODS柱层析（甲醇-水梯度洗脱）和凝胶柱层析（甲醇洗脱），进行分离纯化，得到3个化合物，分别为化合物1（8.6 mg）、化合物2（10.2 mg）、化合物4（12.8 mg）。Fr 3经过MCI树脂（甲醇-水梯度洗脱），硅胶柱层析（氯仿-甲醇梯度洗脱）、反相柱层析（甲醇-水梯度洗脱）以及凝胶柱层析（甲醇洗脱）进行分离纯化，得化合物3（14.1 mg）、化合物5（18.4 mg）和化合物6（16.1 mg）。 2 结果与分析
试验分离得到的6种化合物的结构见图1，化合物1～6经过核磁共振波谱技术测定，并与参考文献进行对比，发现6种化合物均为倍半萜类化合物，且均为首次从茄叶斑鸠菊中分离得到。
2.1 化合物1
3 结论
该研究通过系统分离纯化，从茄叶斑鸠菊全草提取物中分离鉴定了6种倍半萜类化合物，经结构鉴定分别为Incaspitolide D、Ineupatolide、Incaspitolide A、8β-angelyloxy-3β，4β，14-trihydroxy-5αH，6βH，7αH-guai-1（10），11（13）-diene-6，12-olide、caryolane-1，9β-diol、8β-angelyloxy-4α-hydroxy-14-oxo-5αH，6βH，7αH-guai-2，10（14），11（13）-triene-6，12-olide。经检索，6种化合物均为首次从该植物中分离得到，该类化合物具有显著的抗肿瘤、抗HIV、抗病毒、免疫调节、抗菌、抗炎等活性[9-10]。
参考文献
[1] 中国科学院《中国植物志》编辑委员会.中国植物志[M].北京：科学出版社，1985.
[2] 刘清华，杨峻山，索茂荣.斑鸠菊属的倍半萜内酯类及甾体皂苷类化学成分及药理活性研究进展[J].中国中药杂志，2007，32（1）：10-17.
[3] 孙力，巴玉兰，于鲁海，等.斑鸠菊属植物药理活性研究进展[J].新疆中医药，2009，27（6）：82-85.
[4] 史资，陈新，刘梁.DPPH法测定茄叶斑鸠菊不同极性部位的抗氧化活性 [J].食品研究与开发，2017，38（9）：19-21.
[5] BOHLMANN F，SINGH P，JAKUPOVIC J.Further ineupatorolidelike germacranolides from Inula cuspidate[J].Phytochemistry，1982，21（1）：157-160.
[6] BARUAH R N，SHARMA R P，THYAGARAJAN G.Unusual gennacranolides from Inula eupatorioides[J]. J Org Chem，1980，45（24）：4838-4843.
[7] YANG S P，HUO J，WANG Y，et al.Cytotoxic sesquiterpenoids from Eupatorium chinense[J].Journal of natural products，2004，67（4）：638-643.
[8] 王蕾，王雙燕，吴兴德，等.翠柏的化学成分研究.[J].昆明医科大学学报，2013，34（7）：8-11.
[9] ROOS G，PRAWAT H，WALTER C U，et al.New sesquiterpene lactones with antibacterial activity from Verninia fastigiata[J].Planta Med，1998，64：673-674.
[10] RUSSELL B，WILLIAMS A N，CARLA S，et a1.Cytotoxic sesquiterpene lactones from Vernonia pachyclada from the Madagascar rainforest [J].J Nat Prod，2005，68（9）：1371-1374.