【摘 要】
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目的:探讨Toll样受体(Toll like receptor,TLR)-E3泛素连接酶Pellino1 (Peli1)介导的炎性通路在甲基苯丙胺(methamphetamine,Meth)引起BV2小胶质细胞炎性反应中的作用.方法:
【机 构】
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南京鼓楼医院医学心理科,江苏南京210008;南京医科大学公共卫生学院卫生毒理系,江苏南京211166;南京医科大学第一附属医院急诊科,江苏南京210029;南京医科大学附属脑科医院儿童心理卫生研究中
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目的:探讨Toll样受体(Toll like receptor,TLR)-E3泛素连接酶Pellino1 (Peli1)介导的炎性通路在甲基苯丙胺(methamphetamine,Meth)引起BV2小胶质细胞炎性反应中的作用.方法:利用Western blot观察Meth作用后Toll样家族中多种TLR的表达及其下游接头蛋白髓样分化因子(myeloid differentiation factor 88,MyD88)、β干扰素TIR结构域衔接蛋白(TIR-domain-containing adaptor inducing interferon-β,TRIF)水平的改变,同时观察上述接头蛋白下游Pelil蛋白的表达,利用ELISA、实时定量PCR (real time-PCR)及Western blot观察Peli1调节的下游炎性因子及信号通路的改变.结果:Meth作用于BV2细胞后,TLR3、TLR4、TLR7、TLR8、TLR11在特定时间内表达明显上调,同时下游MyD88及TRIF蛋白表达显著增加,其中TRIF具有浓度依赖效应.Meth作用后亦可引起泛素化蛋白Peli1的表达,而利用RNA干扰的方法将Peli1下调后,炎性因子诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、白细胞介素(interleukin-6,IL)-6表达下降,核因子(nuclear factor,NF)-KB的激活明显缓解.结论:TLR介导的炎性信号在Meth引起BV2细胞炎性反应过程中发挥重要作用.因此,基于TLRs-Peli1靶信号轴的干预可能为Meth神经毒性的干预提供靶点,具有潜在的应用意义.
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