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1前言 穿刺培养是微生物教学中重要实验内容，也是常规菌种鉴定中重要手段。通过穿刺培养，不仅可以判断菌株的好氧性与厌氧性，运动情况以及菌株是否发酵产酸等。还可以从运动情况推测菌株是否长有鞭毛。但仅参考书上已有实验操作内容，实验很难成功。关键在于能否掌握其核心技术。笔者在进行一组混合菌种分离、鉴定时，发现营养培养基的选择和加入琼脂量的多少是影响穿刺培养实验成功与否的两个关键因素。