【摘 要】
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目的 探索白藜芦醇(RSV)对碱烧伤小鼠角膜纤维化反应的抑制作用.方法 选取SPF级、健康6～8周龄雄性C57BL/6J小鼠48只,按照随机数字表法分为正常对照组、模型组和RSV组,每组16只.模型组和RSV组小鼠右眼建立角膜碱烧伤模型,左眼不做任何处理.RSV组小鼠用2 g·L-1 RSV溶液滴眼,模型组小鼠用相同剂量的羟丙基-β-环糊精溶液滴眼,连续滴眼21 d.正常对照组小鼠不做碱烧伤和滴眼干预.碱烧伤后21 d,裂隙灯显微镜观察各组小鼠角膜混浊情况,对角膜混浊程度进行评分;通过HE染色观察各组小鼠
【机 构】
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300020 天津市,天津医科大学眼科临床学院;300020 天津市,天津市眼科医院,天津市眼科研究所,天津市眼科学与视觉科学重点实验室;215000 江苏省苏州市,苏州市吴江区儿童医院;641000
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目的 探索白藜芦醇(RSV)对碱烧伤小鼠角膜纤维化反应的抑制作用.方法 选取SPF级、健康6～8周龄雄性C57BL/6J小鼠48只,按照随机数字表法分为正常对照组、模型组和RSV组,每组16只.模型组和RSV组小鼠右眼建立角膜碱烧伤模型,左眼不做任何处理.RSV组小鼠用2 g·L-1 RSV溶液滴眼,模型组小鼠用相同剂量的羟丙基-β-环糊精溶液滴眼,连续滴眼21 d.正常对照组小鼠不做碱烧伤和滴眼干预.碱烧伤后21 d,裂隙灯显微镜观察各组小鼠角膜混浊情况,对角膜混浊程度进行评分;通过HE染色观察各组小鼠角膜组织结构变化;采用免疫荧光染色观察各组小鼠角膜组织中α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅲ型胶原纤维蛋白α1链(COL3A1)的表达;利用Western blot检测各组小鼠角膜组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-SMA、COL3A1蛋白相对表达水平.结果 碱烧伤后21 d,RSV组小鼠角膜混浊评分为(2.25±0.89)分,明显低于模型组[(3.25±0.71)分],差异有统计学意义(P=0.026).HE染色结果显示,模型组小鼠角膜基质中细胞增多,给予RSV干预后细胞相对减少.免疫荧光染色结果显示,RSV组小鼠角膜组织中α-SMA和COL3A1的表达均弱于模型组.Western blot检测结果显示,RSV组小鼠角膜组织中TGF-β1(0.60±0.17)、α-SMA(0.27±0.05)、COL3A1(0.49±0.21)蛋白相对表达水平均显著低于模型组[TGF-β1(1.48±0.50)、α-SMA(0.55±0.18)、COL3A1(1.32±0.87)],差异均有统计学意义(均为P<0.05).结论 在小鼠角膜碱烧伤中,RSV可以有效抑制角膜组织中TGF-β1的表达及肌成纤维细胞的活化,减少COL3A1沉积,从而抑制角膜的纤维化反应,进而减轻角膜混浊程度.
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