ATP荧光法细菌总数快速检测系统

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  全面提高我国食品卫生水平是解决食品安全问题的重要方面,不仅需要法制建设、执法管理、科技保障和全民科学、道德教育等诸多方面的努力,还要赖于建立一套能对食品原料、生产设备。流通营销环节的包装材料、窗口等进行有效卫生监督和预警的技术手段。ATP荧光法细菌总数快检仪是一种利用新型微生物ATP生物发光法测定食品中细菌污染程度的快速检测设备。其依据萤火虫发光原理研制,经国家有关部门鉴定,是具有自主知识产权的第一款国产细菌快检设备。相对于传统的实验室培养法(48-72小时),该仪器在1~5分钟内即可完成测试,而且精确度高、操作简单、携带方便,与电脑连接,可即时检测样品,数分钟便可得到结果。
  组成部件
  体细胞裂解试剂组(TRA):能专而有效地裂解样品中的非细菌细胞(体细胞)并释出ATP,然后通过过滤比色杯底部的滤膜将其排除。
  细菌细胞裂解试剂组(XRA):能专一而有效地裂解样品中细菌细胞并释出ATP。
  荧光反应试剂组(LLR):能与样品中的细菌ATP相互作用并有效地发出荧光。
  功能特点
  ATP荧光法细菌总数快检仪可分度裂解及过滤除去非细菌的干扰,检测时间1~99秒自由设定,量程范围0~1010cfu/mL,实际检测的灵敏度(ATP)为5×10-16moL。
  由于采用了光电信增管光子计数技术并且有效地遮掩了体ATP的干扰,该系统具有很高的灵敏度,此外由于试剂组和微量荧光检测能检测低限相当于大约500个细菌ATP荧光值(RLU),加上拥有样品浓缩装置,系统灵敏性得到了进一步提高,可以检测水和液体制品,构成该系统的组成部件可安放在一个小型手提工具箱内(图1),总重量不超过2.5克,携带方便,系统操作简单。
  
  
  检测步骤
  检测操作应在无菌室内进行,为避免操作过程中的交叉污染,操作人员应戴手套,待检样品要按无菌操作程序采集和处理,用PBS溶液制备咸肉眼可见的凝絮、颗粒,过分黏稠样品须适当稀释。某些检测试剂组用前10分钟应从冰箱内取出置室温平衡。荧光检测仪、试剂组、检测样品应井然有序,合理安放。
  (1)取出双层塑料质比色杯架,底层上垫放5张专用吸水纸,并将带滤膜比色杯放入架眼内,用移液器吸取检样50mL注入杯底。检测前打开荧光检测仪电源,此时液晶显示屏显“0”值。
  (2)用移液器从带蓝盖的TRA试剂瓶吸取体细胞裂解试剂组溶液,向杯底滴加4滴,透明塑料加压器置杯顶加压,使杯中非细菌ATP、游离ATP通过底部滤膜排出,由吸水纸吸净。重复加压步骤一次,取下比色杯置于可拉动抽屉内。
  (3)用移液器从带粉色盖的XRA试剂瓶中吸取细菌细胞裂解试剂组液体两滴,垂直滴入杯底。
  (4)用移液器从LLR试剂瓶吸取荧光反应试剂组50mL加入杯底(图2),缓和的吸挤3次,混匀反应液(从滴加LLR开始通过默数计时,直至抽屉推入检测室为止,务求时间一致对达到平行样品数据一致十分关键)。
  (5)记录屏幕显示的相对荧光值(RLU)。
  应用领域及优点
  ATP荧光法细菌总数快检仪可供食品加工生产的全程监测,快速检测各种样品中的微生物细菌总数。表1列出“快检系统”和“常规平皿计数”方法的差别和利弊。
  快检系统的优点和应用效益:可依据检测得到的实时资料,立即采取对应措施,减少浪费;可在综合分析检测数据的基础上预测未来可能发生的事故;减少清洁消毒的盲目性,提高决策的科学性;大幅度减轻常规细菌总数平皿检测的工作量,提高检测效率;有利于实施HACCP认证体系和管理标准化;为卫生监督员的现场处理提供可靠依据;可广泛应用于食品、饮料生产企业及宾馆饭店的日常卫生规范。
  结论
  国产便携式ATP细菌快速检测系统可以完成液体、固体、表面洁净度等全面的细菌快速检测,并能按国标法将光值自由换算成细菌总数,适用于卫监、工商、食药、环境、工商等相关食品安全执法部门做为执法手段,也可以用于各行业的企业做为微生物检测的手段,控制微生物指标。本系统也可自动储存数据,且连接电脑操作简便,更增加了智能化的效果。该仪器可满足常规检测的要求,达到国外同类产品的性能,并具有价格优势,将为提高我国食品安全水平,建立食品保持期科学预报和溯源制度、公共卫生生物突发事件预警体系,以及食品安全监管发面发挥重要作用。
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