【摘 要】
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目的探讨硫喷妥钠预先给药对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)激活Jurkat细胞NF-κB水平的影响.方法选择人T淋巴瘤细胞系Jurkat细胞,浓度调节至1×105/ml,实验分两部分,1.将细胞随机
【机 构】
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深圳市第二人民医院麻醉科,武汉,Department of Experimental Anesthesiology
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目的探讨硫喷妥钠预先给药对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)激活Jurkat细胞NF-κB水平的影响.方法选择人T淋巴瘤细胞系Jurkat细胞,浓度调节至1×105/ml,实验分两部分,1.将细胞随机分为6组:空白对照组不加入药物;TNF-α 5 U/ml组;400、1 000μg/ml硫喷妥钠组;400μg/ml硫喷妥?TNF-α5 U/ml组和1 000μg/ml硫喷妥钠+TNF-α 5 U/ml组:加入硫喷妥钠1 h后洗去,再加入5 U/mlTNF-α;在加入TNF-α后1 h提取细胞核蛋白,采用凝胶电泳迁移率分析方法测定NF-κB活性,Western杂交法对NF-κB的抑制因子IκB-α进行半定量研究.2.将细胞随机分为8组,空白对照组不加入药物;TNF-α5U/ml组;其他6组先用1000μg/ml硫喷妥钠孵育1 h,随后用PBS冲洗,加入新鲜完全培养基,分别在培养后即刻、2、4、6、8、10 h加入TNF-α 5 U/ml刺激1 h,用上述方法测定NF-κB活性.结果TNF-α可激活Jurkat细胞的NF-κB活性,下调IκB-α表达,1000μg/ml硫喷妥钠可抑制TNF-α激活Jurkat细胞的上述改变.1000μg/ml硫喷妥钠被洗脱后8 h以内对NF-κB活性有抑制作用.结论1 000μg/ml硫喷妥钠对人淋巴瘤Jurkat细胞TNF-α激活的NF-κB活性具有一定的抑制作用,与上调IκB-α表达有关,而且可以被该细胞记忆数小时.
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