【摘 要】
：
目的 研究膀胱癌细胞中黑色素瘤抗原A3 (MAGE-A3)表达及其对膀胱癌细胞增殖及侵袭能力的影响和可能机制.方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和免疫细胞化学染色检测膀胱癌TCC-SUP和EJ28细胞中MAGE-A3 mR-NA和蛋白的表达.采用小干扰RNA(siRNA)敲减MAGE-A3的表达后,通过克隆形成实验、MTT实验及侵袭实验检测其对TCC-SUP细胞的存活、增殖及侵袭能力的影响.蛋白质印迹法检测p21蛋白在TCC-SUP细胞中的表达变化.结果 qRT-PCR结果显示,MAGE-A3 m
【机 构】
：
武汉市第一医院泌尿外科,湖北武汉430022
论文部分内容阅读
目的 研究膀胱癌细胞中黑色素瘤抗原A3 (MAGE-A3)表达及其对膀胱癌细胞增殖及侵袭能力的影响和可能机制.方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和免疫细胞化学染色检测膀胱癌TCC-SUP和EJ28细胞中MAGE-A3 mR-NA和蛋白的表达.采用小干扰RNA(siRNA)敲减MAGE-A3的表达后,通过克隆形成实验、MTT实验及侵袭实验检测其对TCC-SUP细胞的存活、增殖及侵袭能力的影响.蛋白质印迹法检测p21蛋白在TCC-SUP细胞中的表达变化.结果 qRT-PCR结果显示,MAGE-A3 mRNA在TCC-SUP和EJ28细胞中相对表达水平分别为0.188±0.036和0.005±0.001,组间均值差异有统计学意义,t=11.93,P＜0.01.免疫细胞化学染色结果显示,MAGE-A3蛋白在TCC-SUP和EJ28细胞中的阳性细胞数分别为80.33±3.18和6.33±0.88,组间均值差异有统计学意义,t=22.43,P＜0.01.TCC-SUP细胞分别转染si-Random和si-MAGE-A3后,MAGE-A3 mRNA在si-Random组和si-MAGE-A3组的相对表达量分别为0.198±0.011和0.074±0.005,组间均值差异有统计学意义,t=13.83,P＜0.01.MAGE-A3蛋白在si-Random组和si-MAGE-A3组的阳性细胞数分别为78.33±4.91和14.33±2.02,组间均值差异有统计学意义,t=12.04,P＜0.01.克隆形成实验结果显示,si-Random组和si-MAGE-A3组TCC-SUP细胞克隆数分别为112.00±2.31和87.67±7.80,组间均值差异有统计学意义,t=5.90,P＜0.05;MTT实验结果显示,si-Random组和si-MAGE-A3组TCC-SUP细胞的增殖能力分别为1.000±0.094和0.554±0.032,组间均值差异有统计学意义,t=15.54,P＜0.01;侵袭实验结果显示,si-Random组和si-MAGE-A3组TCC-SUP细胞穿膜细胞数为78.67±2.91和56.00±4.59,组间均值差异有统计学意义,t=13.43,P＜0.01.蛋白质印记结果显示,siMAGE-A3组p21蛋白的表达水平(0.528±0.060)较si-Random组(0.121±0.019)增加,t=16.47,P＜0.01.结论 MAGE-A3在膀胱癌细胞TCC-SUP中高表达,其可通过下调p21蛋白的表达而促进膀胱癌细胞的生长.
其他文献
目的 检测肺癌细胞中WW结构域E3泛素蛋白连接酶1(WWP1)和人第10号染色体缺失的磷酸酶(PTEN)表达,并探讨敲低WWP1表达对肺癌SPC-A1细胞增殖和侵袭能力影响机制.方法 利用qRT-PCR和蛋白质印迹法检测肺癌细胞SPC-A1、H1299及正常肺上皮细胞BEAS-2B中WWP1和PTEN表达;WWP1 siRNA转染SPC-A1肺癌细胞以敲低WWP1表达,分为si-NC组,siWWP1#1组及siWWP1#2组,利用qRT-PCR和蛋白质印迹法检测各组细胞WWP1和PTEN表达,通过Tran
目的 通过数据库挖掘,深入探讨血管内皮生长因子A(VEGFA)在结直肠癌中的表达及意义.方法 通过On-comine数据库提取VEGFA在结直肠癌组织和正常组织中的表达数据,采用OncoLnc数据库提取VEGFA预后信息,分析VEGFA表达水平与结直肠癌预后关系;采用CCLE数据库提取VEGFA在结直肠癌细胞中的表达数据,采用String网站获取VEGFA共表达分子并绘制VEGFA共表达网络.结果 Oncomine数据库中共收集452项不同类型的研究结果,差异有统计学意义的研究结果有64项,表达上调的研究
目的 分析核糖核酸结合基序蛋白5 (RBM5)基因对人肺腺癌细胞表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)获得性耐药的影响及作用机制.方法 采用低浓度吉非替尼逐步加量诱导法筛选人肺腺癌吉非替尼耐药细胞株A549/GR.RT-PCR和蛋白质印迹法检测细胞RBM5表达水平;构建RBM5过表达重组质粒,建立稳定过表达RBM5的A549/GR细胞系;检测A549/GR细胞系中RBM5过表达重组质粒转染效率;采用光学显微镜检测过表达RBM5对A549/GR细胞形态变化的影响;采用CCK8实验检测过表达RB
重症监护病房获得性衰弱(intensive care unit-acquired weakness,ICU-AW)是重症监护病房患者常见的神经肌肉功能障碍的全身肌力减弱的并发症,以肌肉耐力降低、轻瘫、脱机困难、反射障碍等为主要表现[1].患者机械通气一周以上ICU-AW的发生率高达25％～100％,严重影响患者的疾病康复、生活质量和生存能力和生活能力[2,3].神经外科ICU患者以神经外科全麻手术后、急危重的脑血管病为主,患者病情不稳定,手术、脱水、神经功能保护辅以镇静镇痛、机械通气等治疗方法,是获得性衰
现如今,我国高血压患者的患病率处于上升趋势,高血压是心脑血管疾病中最为常见的一种,高血压疾病可防可控,其中最有效的干预方式是社区干预.随着国家对基层医疗的加大投入,社区对于高血压疾病的加大防控,但是也增加了社区医护人员的工作压力[1,2].根据研究资料显示,对老年高血压患者采取社区护理干预,可有效地提升患者依从性,改善血压控制效果[3].本次研究探讨社区护理干预运用于老年高血压患者的护理效果.现报道如下.
目的 分析CYP2D6* 10基因多态性与应用多西他赛治疗的晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者疗效及安全性的相关性.方法 选取2013-01-01-2018-10-31就诊于中国医科大学附属第一医院肿瘤内科且完善多基因检测的晚期NSCLC患者53例为研究对象,收集患者CYP2D6* 10基因多态性状态、性别、年龄、是否吸烟、表皮生长因子受体(EG-FR)状态、美国东部肿瘤协作组(ECOG)评分、无进展生存期(PFS)、总生存期(OS)以及不良反应等.分析CYP2D6* 10基因多态性与患者疗效以及安全性关
目的 探讨术前全身免疫炎症指数(SII)和白球比(A/G)对高级别胶质瘤(HGG)患者的预后预测价值.方法 选取2016-01-01-2018-01-31苏州大学附属第三医院初诊的100例HGG患者纳入数据分析.收集患者临床资料、血常规、治疗情况及预后等信息.根据中性粒细胞计数、淋巴细胞计数、血小板计数计算SII和A/G.患者均进行随访,末次随访时间2019-08-20,中位随访时间23个月.计算SII和A/G预测患者预后的最佳临界值,并分析不同SII和A/G水平患者的临床特征差异,Cox回归分析影响HG
目的 探讨丁酸钠(NaB)对氧化偶氮甲烷(AOM)/葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的炎症相关性结直肠癌小鼠模型及其肠道菌群的影响.方法 将40只6周龄C57BL/6J小鼠通过随机数字法分为对照组(Control)、造模组(Model)、低剂量(1.90 g/L)NaB干预造模组(L-NaB)和高剂量(2.85 g/L)NaB干预造模组(H-NaB).Model、L-NaB和H-NaB组一次性腹腔注射AOM 10 mg/kg,饮用3％ DSS水溶液5d,自由饮水16d为1个周期,循环3个周期.Model组自由饮
目的 筛选肺癌骨转移患者血清外泌体中差异表达的mRNA,分析其作为肺癌骨转移标志物的诊断价值.方法 回顾性研究2016-01-01-2019-07-31上海交通大学附属第六人民医院肺癌骨转移患者临床资料,挑选3例肺癌患者发生骨转移前及骨转移后共6例自身对照样本进行高通量测序,采用基因本体论(GO)及京都基因和基因组百科全书(KEGG)对差异基因进行生物信息学分析.通过qPCR对同期本院168例肺癌患者血清外泌体样本中差异最显著的10个基因进行验证.采用受试者工作特征曲线(ROC)评估外泌体差异基因相对表达
目的 探讨微小RNA367-3p(miR-367-3p)对白血病细胞HL-60增殖、侵袭和凋亡的作用及相关机制.方法 采用LipofectamineTM 3000将miR-367-3p mimic、mimic NC、miR-367-3p+ pcDNA3.1、miR-367-3p+ pcDNA3.1-G蛋白信号传导的调节蛋白(RGS) 17分别转染HL-60细胞,作为miR-367-3p过表达组、NC组、miR-367-3p+ pcDNA3.1组和miR-367-3p+ pcDNA3.1-RGS17组,对照