鸡源p53单克隆抗体的制备和鉴定

• 作 者: 李雪琪 陈鸿军 连雪 鲍晨沂 孙海伟 孙雯 JUNG Yon
• 机 构: 南京农业大学动物医学院,中国农业科学院上海兽医研究所
• 出 处: 中国动物传染病学报
• 发表日期: 2018年3期
• 关键词: P53 原核表达 单克隆抗体 鸡 p53 prokaryotic expression monoclonal antibody chicken
• 基金项目: 国家自然基金面上项目（31472218）, 江苏省自然科学青年基金项目（BK20140711）, 留学回国人员科研启动基金（教外司留[2014]1685号）, 中央高校基本业务费（Y0201300526,Y0201300527）, 江苏省优势学科专项经费

转录因子p53广泛参与调节机体生理和病理过程,包括生长发育、新陈代谢、免疫应答、肿瘤发生、发展等,但是禽类p53的生物学功能尚不清楚。本研究扩增鸡p53基因并连入p ET-30a原核表达载体,将载体转化至大肠杆菌BL21中,利用IPTG诱导表达p53蛋白。经SDS-PAGE分离,收集p53蛋白并免疫BALB/c小鼠,制备多克隆抗体。取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,利用免疫印记、间接免疫荧光和酶联免疫吸附法筛选阳性细胞株。共获得6株稳定分泌鸡p53蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为1D7、