苦参碱对体外人Tenon囊成纤维细胞的增生抑制及凋亡促进作用

• 作 者: 嵇芳芳 帅捷 梁亚 俞秋丽 孙贞燕 袁志兰
• 机 构: 南京医科大学第一附属医院眼科 210029,南京医科大学第一附属医院眼科 210029,南京医科大学第一附属医院眼科 210029,南京医科大学第一附属医院眼科 210029,南京医科大学第一附属医院
• 出 处: 中华实验眼科杂志
• 发表日期: 2019年37期
• 关键词: 苦参碱 人Tenon囊成纤维细胞 增生 凋亡 Matrine Human Tenon capsule fibroblast Proliferation Apop

目的

研究苦参碱对体外培养人Tenon囊成纤维细胞(HTFs)增生和凋亡过程的影响。

方法

复苏冻存的HTFs后进行培养、传代，取第3～4代细胞进行实验。用终质量浓度梯度为0、0.3、0.6、0.9 g/L苦参碱作用于体外培养的HTFs 24～72 h，采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测HTFs增生情况；采用流式细胞术检测HTFs的凋亡情况；采用Western blot法、实时荧光定量PCR法检测凋亡相关转录因子caspase-3的表达情况。

结果

在梯度质量浓度苦参碱的作用下，HTFs的增生被抑制，且随时间的延长和质量浓度的增加，抑制效果更明显，差异均有统计学意义(F_浓度＝1 019.51，P＝0.00；F_时间＝5 848.66，P＝0.00；F_交互作用＝147.45，P＝0.00)。0、0.3、0.6和0.9 g/L苦参碱作用后，HTFs的早期凋亡率分别为(2.68±0.30)%、(5.08±0.47)%、(6.97±0.69)%和(10.30±1.20)%，caspase-3蛋白表达的灰度值分别为1.00±0.13、1.90±0.19、2.50±0.30和2.67±0.30，caspase-3 mRNA的相对表达量分别为0.98±0.12、2.01±0.34、6.15±0.60和11.40±1.12，总体比较差异均有统计学意义(F＝55.74、66.01、154.50，均P<0.01)，随着苦参碱质量浓度的升高，HTFs的早期凋亡率明显升高，caspase-3蛋白、caspase-3 mRNA的相对表达量明显升高，各质量浓度组间两两比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。

结论

苦参碱可抑制体外培养HTFs的增生，并呈剂量及时间依赖性；苦参碱可促进HTFs凋亡。