【摘 要】
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目的建立快速、灵敏检测沙门菌的免疫层析试纸方法。方法根据沙门菌的16S DNA序列设计引物进行PCR扩增,并根据PCR产物设计2种特异性探针(探针B和探针F),分别在其5’端和3’端
【机 构】
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吉林农业大学,军事医学科学院军事兽医研究所,一汽总医院,
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目的建立快速、灵敏检测沙门菌的免疫层析试纸方法。方法根据沙门菌的16S DNA序列设计引物进行PCR扩增,并根据PCR产物设计2种特异性探针(探针B和探针F),分别在其5’端和3’端标记Biotin和FAM。PCR产物与探针杂交后应用于免疫层析试纸条。当检测有沙门菌时试纸条会出现2条红线,当没有沙门菌会出现1条红线。对探针的浓度进行优化后,检测沙门菌以及其他7种细菌分析该方法的特异性,并检测不同浓度(107cfu/ml~101cfu/ml)的沙门菌,分析其灵敏度。结果探针的最优浓度为1μmol/L,检测除沙门菌外的其他7种细菌,结果均显示阴性,检测沙门菌的最低浓度为10~2cfu/ml。结论该实验方法的灵敏度高、特异性好,适用于检测沙门菌,有良好的应用性。
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