【摘 要】
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目的:探讨海南五指山裸花紫珠(LHZZ)对鼻咽癌(NPC)细胞顺铂(DDP)诱导凋亡敏感性的影响,并探究其作用机制.方法:细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测不同浓度DDP(0,2,4,8,16,32 mg·L-1)和不同浓度海南五指山裸花紫珠(0,25,50,75,100 mg·L-1)处理后的细胞存活率.实验分组为空白组(正常HNE1细胞),DDP组(8 mg·L-1,24 h),LHZZ组(50 mg· L-1,24 h),DDP+LHZZ组(8mg·L-1 DDP+50 mg·L-1LHZZ,2
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目的:探讨海南五指山裸花紫珠(LHZZ)对鼻咽癌(NPC)细胞顺铂(DDP)诱导凋亡敏感性的影响,并探究其作用机制.方法:细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测不同浓度DDP(0,2,4,8,16,32 mg·L-1)和不同浓度海南五指山裸花紫珠(0,25,50,75,100 mg·L-1)处理后的细胞存活率.实验分组为空白组(正常HNE1细胞),DDP组(8 mg·L-1,24 h),LHZZ组(50 mg· L-1,24 h),DDP+LHZZ组(8mg·L-1 DDP+50 mg·L-1LHZZ,24 h),DDP+LHZZ+核因子E2相关因子2(Nrf2)激活剂莱菔硫烷(SFN)组(8 mg·L-1 DDP+50 mg·L-1LHZZ,24 h;然后10μmol·L-1SFN,24 h),CCK-8法检测细胞存活率,集落克隆形成实验检测细胞集落形成能力,流式细胞术和原位末端标记法(TUNEL)染色检测细胞凋亡情况,荧光探针2\',7\'-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)检测培养细胞活性氧(ROS)水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞内凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测细胞内Nrf2,抗氧化反应元件(ARE) mRNA表达.结果:与空白组比较,经过不同浓度DDP和不同浓度LHZZ处理后,细胞存活率均明显下降(P＜0.05);与DDP组和LHZZ组比较,DDP+LHZZ组细胞存活率下降,细胞集落克隆形成数目减少,细胞凋亡水平升高,Bcl-2蛋白表达水平下调,Bax和Caspase-3蛋白表达水平则上调,差异具有统计学意义(P＜0.05);而在DDP+LHZZ组中加入SFN激活Nrf2/ARE信号通路,上述效果均受到抑制(P＜0.05).此外,与空白组比较,LHZZ组细胞内ROS水平下调(P＜0.05);与DDP组比较,DDP+LHZZ组ROS水平明显下调(P＜0.05);与DDP+LHZZ组比较,DDP+LHZZ+SFN组细胞ROS水平明显上调(P＜0.05).结论:LHZZ可增加DDP诱导的鼻咽癌细胞凋亡的敏感性,其机制可能与阻断Nrf2/ARE信号通路并抑制ROS水平相关.
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