应用mRNA差异显示技术筛选大鼠小脑颗粒神经元凋亡模型中差异表达基因

• 作 者: 银巍 黄奕俊 皮荣标 苏兴文 赵灵芝 邱鹏新 颜光美
• 机 构: 中山大学中山医学院生化教研室,中山大学中山医学院药理教研室,中山大学中山医学院中山大学药学院
• 出 处: 中国病理生理杂志
• 发表日期: 2007年11期
• 关键词: 细胞凋亡 差异表达基因 小脑 神经元 Apoptosis Differentially expressed genes Cerebellum Neuro
• 基金项目: 基金项目：国家杰出青年基金资助项目（No.39625022）,广东省自然科学基金资助项目（No.05001739）,广东省科技计划资助项目（No.2KN028091）,广东省自然科学基金团队资助项目（No.039191）,广东省关键领域重点突破资助项目（No.2003A10905）

目的：应用mRNA差异显示技术对大鼠小脑颗粒神经元凋亡模型中差异表达基因进行筛选，克隆以及鉴定。方法：大鼠小脑颗粒神经元的分离和原代培养；对大鼠小脑颗粒神经元凋亡逆转模型进行荧光mRNA差异显示逆转录PCR（FDDRT-PCR，fluorescent differential display RT-PCR）；EST片段亚克隆入pGEM-T Ea-sy^TM，克隆后测序并进行序列同源性检索；反Northern杂交重鉴定与筛选。结果：通过DDRT-PCR获得164个在小脑颗粒神经元凋亡模型中差异表达的ESTs