【摘 要】
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目的 探讨基质金属蛋白酶9(MMP-9)在粒细胞集落刺激因子(G-CSF)诱导的造血干/祖细胞(HSPC)动员中的作用.方法 应用酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫组织化学、逆转录聚合酶链反
【机 构】
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吉林省肿瘤医院肿瘤内科,中国医学科学院,天津市脐带血造血干细胞库
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目的 探讨基质金属蛋白酶9(MMP-9)在粒细胞集落刺激因子(G-CSF)诱导的造血干/祖细胞(HSPC)动员中的作用.方法 应用酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫组织化学、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)等方法测定了健康供者稳态及G-CSF动员第5天骨髓、外周血MMP-9蛋白及mRNA水平的变化,比较富含MMP-9的细胞系HT1080无血清培养上清孵育前后CD34+细胞表面CXCR4表达及对基质细胞衍生因子1(SDF-1)的迁移能力的变化,将rhMMP-9与rhSDF-1孵育后应用Western印迹检测MMP-9对SDF-1的降解作用,观察注射MMP-9化学抑制剂(MPI) ο-邻二氮杂菲对G-CSF动员BALB/c小鼠外周血成熟白细胞计数(WBC)和干/祖细胞的数量的影响.结果 G-CSF动员第5天,骨髓上清MMP-9浓度增加了6.6倍 (P＜0.01),骨髓组织表达MMP-9的中性粒细胞明显增多.动员后骨髓单个核细胞MMP-9 mRNA表达水平上调 (P＜0.05).rhSDF-1与rhMMP-9短期孵育后可被后者降解.HT1080无血清培养上清液能够上调脐血和动员外周血富集的CD34+细胞的CXCR4表达水平(均P＜0.05)及增强CD34+细胞向SDF-1浓度梯度迁移能力(均P＜0.05),该效应可被MPI阻断(P＜0.05).与G-CSF共注射MPI后BALB/c小鼠外周血成熟WBC(12.3×106/L±1.2×106/L)和造血祖细胞集落形成单位(69 U/2×105 MNC±3 U/2×105 MNC)数量显著低于对照组(P＜0.05).结论 MMP-9可能通过裂解SDF-1、上调CD34+细胞表面SDF-1特异性受体CXCR4的表达及增强CD34+细胞迁移能力在G-CSF介导的HSPC动员中发挥重要作用.
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