萧山鸡IL-2基因真核表达载体构建及其在Vero细胞中的表达

• 作 者: 谢荣辉 方维焕 李建荣 卢觅佳 于涟
• 机 构: 浙江大学
• 出 处: 浙江农业大学学报
• 发表日期: 2003年6期
• 关键词: 萧山鸡 IL-2基因 真核表达载体 VERO细胞 减毒沙门氏菌 白细胞介素2 attenuated Salmonella typhimurium Xiaosh
• 基金项目: 浙江省科技计划，浙江省自然科学基金，浙江省自然科学基金

扩增萧山鸡白细胞介素2(IL-2)基因,将其插入真核表达载体pCI构建重组质粒pCI-IL-2,高压电击法将重组质粒转化入减毒沙门氏菌,并直接转染Vero细胞,提取细胞总DNA,DIG标记探针可检测到阳性杂交信号.用FITC标记的羊抗兔IgG进行间接免疫荧光试验,可检测到特异性黄绿色荧光.SDS-PAGE和Western blotting可检测到18.5 kD和14.5 kD的蛋白条带.表明减毒沙门氏菌能将重组质粒pCI-IL-2携带进入Vero细胞内表达IL-2,且表达产物具有免疫反应性,为今后研制鸡I