鸡传染性支气管炎病毒H52毒株S基因的克隆及序列分析

• 作 者: 程丽琴 周继勇 沈行燕 陈吉刚 陈声明
• 机 构: 浙江大学,浙江大学
• 出 处: 浙江大学学报：农业与生命科学版
• 发表日期: 2002年3期
• 关键词: 鸡传染性支气管炎病毒H52毒株 S基因 克隆 序列分析 avian infectious bronchitis virus RTPCR S gene clo
• 基金项目: 国家自然科学基金

将含有鸡传染性支气管炎病毒(IBV)H52毒株的尿囊液浓缩,用TRIzol 试剂抽提病毒RNA作为反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)的模板,参照已发表的IBV-Beaudette 株S基因序列,设计并合成一对特异性引物,扩增得到长度约3.6 kb 的S基因片段,利用引物设计中EcoR I和BamH I 酶切位点插入到克隆载体pBlueScript SK 的多克隆位点中,转化感受态E.coli DH5α.经酶切分析和PCR等方法鉴定,筛选出阳性克隆,进行核苷酸序列测定,证实获得了S 基因的全长序列.利用D