目的 探讨Hedgehog(Hh)信号通路在缺氧肠上皮屏障功能调控的作用.方法 大鼠小肠上皮细胞系IEC-6细胞分为3组:常氧组(21％氧浓度)、缺氧组(2％氧浓度)、缺氧+环巴胺组(用5 mmol/L的环巴胺预处理30 min后,再给予2％氧浓度进行缺氧处理).RT-PCR检测Hh信号通路IHH、PTCH、GLI-1 mRNA的表达变化,电阻测定仪检测跨上皮电阻(TER),Western blot检测IHH、紧密连接蛋白经典表达分子胞质附着蛋白(ZO-1)、咬合蛋白(Occludin)、闭合蛋白(Claudin-1)的表达情况.组间比较采取单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验.结果 RT-PCR检测结果表明:常氧组Hh信号通路IHH、PTCH、GLI-1 mRNA的相对表达量分别为0.056±0.009、0.459±0.087、0.142±0.023；缺氧组分别为0.303±0.052、0.678±0.073、0.483±0.061,两组比较,差异有统计学意义(t=-14.05,-11.85,-6.52,P＜0.05).Western blot检测结果显示:常氧组和缺氧组的IHH相对蛋白表达量分别为0.39±0.06和0.91±0.15,两组比较,差异有统计学意义(t=-8.08,P＜0.05).常氧组、缺氧组和缺氧+环巴胺组的TER分别为(134±5) Ohm/cm2、(100±6)Ohm/cm2、(118±5)Ohm/cm2,3组比较,差异有统计学意义(F=1.04,P＜0.05).与常氧组比较,缺氧组下降约27.7％(t=7.84,P＜0.05)；与缺氧组比较,缺氧+环巴胺组回升约16.4％,但仍低于常氧组(t=4.23,P＜0.05).常氧组胞质附着蛋白-1、咬合蛋白、闭合蛋白-1的表达分别为1.18±0.24、0.80 ±0.13、0.90±0.09,缺氧组分别为0.58±0.08、0.32±0.05、0.50±0.09,缺氧+环巴胺组分别为0.92 ±0.21、0.43 ±0.10、0.82±0.11,3组比较,差异有统计学意义(F=4.95,2.88,10.09,P＜0.05).缺氧组较常氧组分别降低48.7％、40.0％、55.6％(t=12.86,9.35,18.90,P＜0.05)；缺氧+环巴胺组较缺氧组分别提高59.9％、35.2％、65.1％(=5.63,2.92,6.66,P＜0.05).结论 缺氧条件可刺激激活Hh信号通路,从而引起紧密连接蛋白表达降低,导致肠上皮屏障功能损害。
Hedgehog信号通路在缺氧肠上皮屏障功能调控的作用
【摘 要】
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目的 探讨Hedgehog(Hh)信号通路在缺氧肠上皮屏障功能调控的作用.方法 大鼠小肠上皮细胞系IEC-6细胞分为3组:常氧组(21％氧浓度)、缺氧组(2％氧浓度)、缺氧+环巴胺组(用5 mmol/L的环巴胺预处理30 min后,再给予2％氧浓度进行缺氧处理).RT-PCR检测Hh信号通路IHH、PTCH、GLI-1 mRNA的表达变化,电阻测定仪检测跨上皮电阻(TER),Western blo
【机 构】
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400037重庆,第三军医大学新桥医院普通外科,400037重庆,第三军医大学新桥医院普通外科,400037重庆,第三军医大学新桥医院普通外科,400037重庆,第三军医大学新桥医院普通外科,4000
【出 处】
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中华消化外科杂志
【发表日期】
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2013年12期
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