【摘 要】
：
目的 探讨在脓毒症模型中几丁质酶-3样蛋白1(CHI3L1)介导骨骼肌干细胞损伤的潜在机制.方法 用6种浓度的脂多糖(LPS)刺激体外培养的小鼠骨骼肌卫星细胞,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和细胞增殖与毒性试剂盒(CCK-8)筛选出细胞处理最佳浓度.构建CHI3L1过表达和干扰载体转染骨骼肌卫星细胞,采用聚合酶链反应(PCR)、蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)验证转染效率.将细胞按随机数字表法分为空白对照组(不加任何干预的细胞)、模型组(LPS刺激未转染的细胞)、过表达CHI3L
【机 构】
：
南昌大学第二附属医院重症医学科,江西南昌330006
论文部分内容阅读
目的 探讨在脓毒症模型中几丁质酶-3样蛋白1(CHI3L1)介导骨骼肌干细胞损伤的潜在机制.方法 用6种浓度的脂多糖(LPS)刺激体外培养的小鼠骨骼肌卫星细胞,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和细胞增殖与毒性试剂盒(CCK-8)筛选出细胞处理最佳浓度.构建CHI3L1过表达和干扰载体转染骨骼肌卫星细胞,采用聚合酶链反应(PCR)、蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)验证转染效率.将细胞按随机数字表法分为空白对照组(不加任何干预的细胞)、模型组(LPS刺激未转染的细胞)、过表达CHI3L1组(LPS刺激转染了CHI3L1过表达质粒的细胞)、过表达CHI3L1对照组(LPS刺激转染了空载质粒的细胞)、干扰CHI3L1组(LPS刺激转染了CHI3L1干扰序列的细胞)、干扰CHI3L1对照组(LPS刺激转染了CHI3L1干扰序列阴性对照的细胞).采用ELISA检测细胞外天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1(caspase-1)和白细胞介素-1β(IL-13)的含量;采用Western blotting检测细胞中IL-13、信号转导和转录激活因子3(STAT3)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)的蛋白表达水平.结果 根据CCK-8和ELISA检测结果筛选出最佳浓度为5 mg/L的LPS进行后续实验,且PCR、Western blotting证实转染有效.与空白对照组比较,模型组细胞外IL-1 β、caspase-1含量和细胞中Akt、p-Akt、IL-1 β的蛋白表达水平均明显升高[IL-1 β (ng/L):11.22±0.55比8.63±0.63,caspase-1 (pmol/L):9.47±0.22比8.65±0.15,Akt/GAPDH:1.36±0.12比1.06±0.15,p-Akt/GAPDH:0.78±0.07比0.09±0.01,IL-1β/GAPDH:1.38 ±0.12比0.18±0.03,均P＜0.05].与模型组、过表达CHI3L1对照组比较,过表达CHI3L1组细胞外IL-1β、caspase-1含量和细胞中p-Akt、IL-1 β的蛋白表达均明显升高[IL-1 β (ng/L):14.93 ±0.97比11.22±0.55、9.38±0.40,caspase-1 (pmol/L):10.35±0.03比9.47±0.22、8.46±0.24,p-Akt/GAPDH:1.21 ±0.04比0.78±0.07、0.63±0.04,IL-1β/GAPDH:1.87±0.08比1.38±0.12、1.51 ±0.17,均P＜0.05].与模型组、干扰CHI3L1对照组比较,干扰CHI3L1组细胞外IL-1β和caspase-1含量及细胞中p-Akt、IL-1β的蛋白表达均明显降低[IL-1β (ng/L):8.98±0.73比11.22±0.55、10.44±0.65,caspase-1 (pmol/L):7.61 ±0.63比9.47±0.22、8.37±0.38,p-Akt/GAPDH:0.50±0.04比0.78±0.07、0.94±0.06,IL-1β/GAPDH:0.77±0.02比1.38±0.12、1.13±0.07,均P＜ 0.05].结论 CHI3L1可能通过caspase-1和IL-1β介导脓毒症模型中小鼠骨骼肌干细胞的损伤;CHI3L1可能参与了调控骨骼肌干细胞中Akt的信号通路,而对STAT3信号通路无明显影响.
其他文献
DM患者患骨质疏松症的患病风险较高.二肽基肽酶4(DPP-4)广泛表达于全身组织器官.DPP-4抑制剂通过诱导间充质干细胞分化、减少AGEs聚集、增加IGF-1自分泌、抑制炎症因子表达、延长GLP-1及葡萄糖依赖性促胰岛素分泌多肽半衰期、促进APN分泌、改善维生素D水平、降低硬骨素水平等途径,对骨代谢产生一定影响.本文对DPP-4抑制剂对骨代谢的研究进展进行综述,旨在为临床治疗DM合并骨质疏松症提供依据.
目的 探讨艾塞那肽注射治疗对肥胖T2DM患者生存质量的影响.方法 纳入22例肥胖T2DM患者,采用36项简式健康调查和世界卫生组织生存质量测定简表评估患者基线和艾塞那肽注射治疗26周后的生存质量.结果 2例患者退出试验.与基线比较,治疗26周后,体重、WC、FPG、HbA1c均降低(P<0.05或P<0.01),躯体功能、情绪健康问题导致的角色限制、躯体健康领域(PHYS)、心理领域、社会关系领域和环境领域评分均升高(P<0.05或P<0.01).Pearson相关分析显示,HbA1c与PHYS呈负相关(
目的 观察维格列汀二甲双胍复方制剂、达格列净三联治疗新诊断T2DM患者的疗效及安全性.方法 选取2019年7月至2020年3月于我院内分泌科门诊就诊的新诊断T2DM患者68例,随机分为观察组(Obs)和对照组(Con),每组各34例.Obs组采用维格列汀二甲双胍复方制剂+达格列净(达格列净10 mg,qd);Con组采用维格列汀二甲双胍复方制剂(50 mg/850 mg,bid).观察12周,比较两组治疗前后FPG、2 hPG、HbA1c、FC-P、FIns、胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)、TC、TG
目的 建立脓毒性心肌病(SCM)的临床诊断评分体系,并评价其诊断效能.方法 采用前瞻性队列研究方法,连续入选2019年1月至2020年12月就诊于中国康复研究中心急诊科的脓毒症和脓毒性休克患者.收集患者一般资料、既往史,入院时心率(HR)、平均动脉压(MAP)、体温、呼吸频率(RR),测定白细胞计数(WBC)、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)、血乳酸(Lac)等实验室指标,入院24 h内、第7d分别行经胸超声心动图,并进行序贯器官衰竭评分(SOFA)、急性生理学与慢
最新流行病学调查数据[1]显示,2015～2017 年我国≥18岁人群T2DM患病率高达11. 2％,治疗率不足50％, DM 治疗管理亟待重视.长期药物治疗是改善血糖的关键,其中基础胰岛素方案便捷易行,是各国指南推荐的首选胰岛素起始方案[2-4].与口服药相比,胰岛素标准化使用需要医护人员和患者密切合作,医护人员培训及其专业技能提升、患者自身综合教育以及医患双方沟通至关重要.
特纳综合征(TS)是较罕见的性染色体疾病,染色体核型表现为X染色体部分或完全丢失.TS合并自身免疫性疾病发病率高.本例患者以DKA起病,体型瘦小,临床诊断为桥本氏甲状腺炎及LADA.本文通过探讨TS与LADA的潜在机制,旨在提高认识并及时筛查TS并发症.
目的 观察外周5-羟色胺(5-HT)诱导中性粒细胞胞外诱捕网(NET)的生成对脓毒症小鼠肺损伤的影响.方法 选择6～8周龄野生型(WT型)和Tph1基因敲除(Tph1Ko) C57小鼠,按随机数字表法分为WT小鼠假手术组、WT小鼠脓毒症组和Tph1KO小鼠假手术组、Tph1KO小鼠脓毒症组.假手术组小鼠接受假手术处理(仅打开腹腔翻动盲肠但不结扎和穿刺,然后关腹);脓毒症组小鼠接受盲肠结扎穿孔术(CLP)建立脓毒症模型.术后12h处死小鼠,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF
桑枝提取物是以桑树枝为原材料,经提取、分离、纯化得到的有效提取物,主要包含生物碱、黄酮、多糖和氨基酸等成分.其中,降糖有效部位即桑枝总生物碱(SZ-A)具有双糖酶抑制活性,由1-脱氧野尻霉素(1-DNJ)、荞麦碱(FAG)和1,4双脱氧-1,4-亚氨基-D-阿拉伯糖醇(DAB)组成,DNJ占70％,FAG和DAB各占15％.口服SZ-A后,DNJ、FAG和DAB分别在0.67、1.30和0.67 h内达到最大血浆浓度.SZ-A对小肠糖苷酶有高选择性的抑制作用,单药使用有效降低HbA1c 1.0％,在用药早
目的 探讨脓毒症继发慢性重症(CCI)患者的临床特征.方法 选取2019年4月至2020年10月深圳市宝安区中心医院重症医学科首次入院的脓毒症存活患者,依据临床转归分为CCI组[重症监护病房(ICU)住院时间≥14d,存在持续的器官功能障碍]和快速康复(RAP)组,收集并比较两组患者的入院基本情况和临床结局.所有患者入院后均取血,测定血清白细胞介素(IL-6、IL-10)水平及外周血淋巴细胞计数(LYM);比较两组入院1、7、14d上述指标的差异,并观察两组180 d累积生存率.结果 ①纳入脓毒症继发CC
目的 评估宏基因组二代测序(mNGS)技术在支气管肺泡灌洗液(BALF)中检测病原菌对重症监护病房(ICU)器官移植患者肺部感染的诊断价值.方法 采用回顾性研究方法,收集2018年8月至2021年8月中国科学技术大学附属第一医院重症医学科收治的46例器官移植后肺炎/疑似肺炎患者的BALF,均进行了同步mNGS和常规微生物综合试验(CMT)检测,并以CMT结果作为参考标准,比较mNGS和CMT在器官移植患者肺部感染中诊断价值的差异,并分析mNGS对于混合感染的诊断价值.结果 ①肺炎病原体:在入组的35例患者