含有小鼠CD40、IgG2aFc基因片段腺病毒的构建及检测

• 作 者: 李传光 谭映霞 沈志坚 张启瑜
• 机 构: 温州医学院附属第一医院
• 出 处: 实用医学杂志
• 发表日期: 2009年13期
• 关键词: 抗原 CD40 PDC316质粒 融合基因 质粒构建 重组腺病毒 Antigens CD40 PDC316 ptasmid Fusion gene Pla

目的：构建栽有小鼠CD40-IgG2aFc-IRS—GFP融合基因片段的腺病毒载体,并检测其转染293细胞后的融合蛋白表达及出毒情况。方法：提取小鼠CD40、IgG2aFc基因片段构建PDC316-IgG2aFc-IRS-GFP质粒，测序成功后包装构建Ad5-PDC316-CD40-IgG2aFc-IRS-GFP，转染293细胞。出毒后大量复制病毒并纯化。测定病毒滴度，体外感染细胞观察病毒复制及分泌目的蛋白情况并检测目的蛋白表达量。结果：成功构建了质粒及病毒，体外感染显示该病毒能有效地感染细胞并表达蛋白（