农杆菌介导巨桉Eg5高效遗传转化

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以巨桉(Eucalyptus grandis)无性系Eg5叶片为外植体,探讨了农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)侵染时间、共培养pH值和共培养时间对瞬时转化效率的影响,分析了不同筛选策略对遗传转化植株筛选效果的影响。结果表明,外植体侵染45分钟,共培养pH值为5.8,共培养3天所得到的瞬时转化效率最高;逐步提高卡那霉素(Km)浓度筛选转基因植株有效,筛选率达到15%,转化率达到0.26%。经过GUS染色分析和PCR检测,证实为转基因植株。 The effect of Agrobacterium tumefaciens infection time, co-culture pH value and co-culture time on the instantaneous transformation efficiency was studied using Eg5 leaves of Eucalyptus grandis as explants. The effects of different screening strategies on the inheritance Effects of Screening on Transformed Plants. The results showed that explants infiltrated for 45 minutes, the co-culture pH value was 5.8, the highest instantaneous transformation efficiency was obtained after 3 days of co-culture; the Km concentration was gradually increased to screen the transgenic plants, the screening rate reached 15% , Conversion rate reached 0.26%. After GUS staining analysis and PCR detection, confirmed that the transgenic plants.
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