【摘 要】
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目的 探索软骨细胞外泌体在大鼠颞下颌关节(temporomandibular joint,TMJ)骨关节炎(osteoarthritis,OA)退变软骨异常钙化中的作用.方法 选取48只6周龄雌性SD大鼠,根据实验时
【机 构】
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军事口腔医学国家重点实验室,国家口腔疾病临床医学研究中心,陕西省口腔疾病国际联合研究中心,第四军医大学口腔医院口腔解剖生理学教研室,陕西西安710032;第四军医大学基础医学院二大队八队,陕西西安71
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目的 探索软骨细胞外泌体在大鼠颞下颌关节(temporomandibular joint,TMJ)骨关节炎(osteoarthritis,OA)退变软骨异常钙化中的作用.方法 选取48只6周龄雌性SD大鼠,根据实验时间点(2、4、8周)随机分为三大组,每大组再随机分为对照组与单侧前牙反(牙合)(unilateral anterior crossbite,UAC)实验组,每组8只大鼠.对UAC实验组大鼠施加UAC刺激诱导TMJOA,于2、4、8周后分别处死各组大鼠,对TMJ髁突软骨进行CD63、基质羧基谷氨酸蛋白(matrix gla protein,MGP)的免疫组化染色和mRNA含量检测,同时透射电镜观察软骨中钙化痕迹及外泌体结构.提取大鼠TMJ髁突软骨细胞体外培养并施加流体剪切力刺激,茜素红染色检测钙化结节形成情况,对软骨细胞和外泌体蛋白进行Western Blot检测.结果 UAC实验组大鼠TMJ髁突软骨内CD63分子高表达,同时在钙化痕迹周围存在大量外泌体样结构,而MGP含量则在4周和8周时显著减少.流体剪切力可显著促进TMJ髁突软骨细胞钙化结节形成,同时外泌体数目增多,但外泌体中MGP蛋白含量显著降低.对正常培养的软骨细胞施加外泌体后可显著促进钙化结节的生成.结论 大鼠TMJOA软骨中外泌体数目增加,同时外泌体内MGP含量降低,两方面共同促进软骨异常钙化的发生.
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