8-（6-氨基己烷）-氨基-NADH的制备和表征

• 作 者: 马洪静 王平 苏志国 张松平
• 机 构: 中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室,中国科学院研究生院,DepartmentofBioproductsandBiosystemsEngineering
• 出 处: 过程工程学报
• 发表日期: 2009年5期
• 关键词: 8-(6-氨基己烷)-氨基-NADH 辅酶修饰 辅酶稳定性 辅酶活性 8-（6：aminohexyl）-amino-NADH coenzyme modific
• 基金项目: 国家自然科学基金资助项目（编号：20576135,20728607）,国家高技术研究发展计划（863）基金资助项目（编号：2006AA022217）,中国科学院知识创新基金资助项目（编号：KSCX2-YW-G-019）

采用1,6-己二胺对烟酰胺辅酶（NADH）的腺嘌呤C8位点进行定点修饰，通过DEAE—Sepharose层析分离得到产物8-（6-氨基己烷）-氨基-NADH．经优化制备过程和分离条件，其收率可达60％．在pH2．2-8．0内系统考察了修饰产物的pH稳定性，结果表明在不同种类的缓冲液中，修饰后辅酶的稳定性均有显著提高，在pH6．5的柠檬酸盐和pH8．0的磷酸盐缓冲液中，半衰期分别延长11和5倍．通过利用乳酸脱氢酶（LDH）和谷氨酸脱氢酶（GDH）测定修饰前后辅酶的活性，发现相同反应条件下修饰后辅酶的反应速率