负性共刺激分子B7-H4赋予肾癌细胞对化疗药物的耐药性研究

• 作 者: 李金美 宋慧 练启慧 陈敏吉 章良 谢炜
• 机 构: 苏州大学医学部药学院,苏州大学医学部基础医学与生命科学学院免疫学系
• 出 处: 中国药科大学学报
• 发表日期: 2013年6期
• 关键词: B7-H4 肾癌细胞 5-氟尿嘧啶 核定位序列 耐药性 B7-H4 renal cell carcinoma 5-fluorouracil（5-Fu）

通过RT—PCR方法克隆出人野生型负性共刺激分子B7-H4基因，将目的片段双酶切（EcoRI和BamHI）后，与plRES2-EGFP真核表达载体连接，构建重组真核表达载体plRES2-EGFP—B7-H4-wT并进行鉴定；然后用定点突变法构建B7-H4核定位序列突变体基因，再构建重组真核表达载体plRES2-EGFP—B7-H4-NLS—MT；脂质体转染法将重组载体导入786-O细胞，CCK8法研究转基因细胞株的增殖率及对化疗药物5．氟尿嘧啶、阿霉素和顺铂的耐药性。结果显示：B7-H4野生型转基因细胞株