【摘 要】
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为了挖掘光皮桦材性相关基因,本研究以光皮桦木质部为材料,通过对RNA的提取、cDNA的反转录及纯化的对比分析,以及选扩体系优化等,建立了相应的cDNA-AFLP体系.结果表明:采用CTAB和RNAiso试剂相结合的方法得到的RNA质量较好,cDNA经纯化后选扩效果明显变好.选扩体系为:4.0 μL预扩产物(稀释40倍)、1.6 μL的引物(10.0 μmol/L)、0.2 μL的dNTP(2.S
【机 构】
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浙江省、杭州市、临安市、311300 浙江农林大学亚热带森林培育国家重点实验室培育基地
【出 处】
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中国林学会林木遗传育种分会第七届全国林木遗传育种学术大会
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为了挖掘光皮桦材性相关基因,本研究以光皮桦木质部为材料,通过对RNA的提取、cDNA的反转录及纯化的对比分析,以及选扩体系优化等,建立了相应的cDNA-AFLP体系.结果表明:采用CTAB和RNAiso试剂相结合的方法得到的RNA质量较好,cDNA经纯化后选扩效果明显变好.选扩体系为:4.0 μL预扩产物(稀释40倍)、1.6 μL的引物(10.0 μmol/L)、0.2 μL的dNTP(2.S mmol/L)、0.4μL的Mg2+(25.0 mmol/L),以及0.2 μL的Taq DNA聚合酶(5 U/μL).进一步以来自不同木质化茎段的cDNA为模板,筛选出31对扩增效果较好的引物组合,同时分离出一些差异表达的基因片段,经测序后探讨了其在木质化发育过程中可能的功能.
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