【摘 要】
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目的 探讨肾衰康灌肠液含药血清改善肾小管上皮细胞株(HK-2)细胞缺氧/复氧损伤的作用是否与抑制CHOP/ER01-α凋亡信号通路减轻内质网应激介导的细胞凋亡有关.方法 利用家兔灌
【机 构】
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成都中医药大学附属医院,四川成都610075
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目的 探讨肾衰康灌肠液含药血清改善肾小管上皮细胞株(HK-2)细胞缺氧/复氧损伤的作用是否与抑制CHOP/ER01-α凋亡信号通路减轻内质网应激介导的细胞凋亡有关.方法 利用家兔灌肠制备肾衰康灌肠液含药血清,二氯化钴(CoCl2)进行缺氧/复氧模型建立,牛血清体外培养肾小管上皮细胞株(HK-2).实验分为对照组(不予处理)、模型组(建立缺氧/复氧损伤模型)、肾衰康组(建立缺氧/复氧模型后加入肾衰康含药血清)、4-PBA组(缺氧/复氧模型建立后加入内质网抑制剂),于缺氧/复氧模型建立后0,4,12h利用CFSF/PI染色检测各组细胞的凋亡情况,RT-qPCR检测GRP78、CHOP、ERO1-α的mRNA表达,以及Western Blot检测GRP78、CHOP、ERO1-α蛋白表达情况.结果 与对照组比较,模型组出现了明显的细胞凋亡;与模型组比较,肾衰康组组缺氧/复氧损伤HK-2细胞死亡率明显降低,并表现出明显的凋亡抑制作用.4h、12h,与对照组比较,模型组组CHOP、ERO1-α、GRP78的蛋白及mRNA表达明显增加(P＜0.05),说明模型组HK-2细胞发生了ERS,且CHOPERO1-α凋亡信号通路被激活,与模型组比较,肾衰康组、4-PBA组CHOP、ERO1-α蛋白及mRNA表达明显被抑制(P ＜0.05),说明肾衰康与4-PBA作用相似,均能减轻缺氧/复氧损HK-2细胞内质网应激,抑制CHOP/ERO1-α凋亡信号通路.结论 肾衰康灌肠液可以有效改善HK-2细胞缺氧/复氧损伤作用,该机制是通过下调CHOP、ERO1-α表达抑制CHOP/ERO1-α凋亡信号通路减轻内质网应激介导的凋亡而发挥作用.
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