【摘 要】
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为建立肠致病性大肠杆菌(EPEC)的快速检测方法,本研究以EPEC bfp A基因为靶基因设计了一对双启动寡核苷酸引物(DPO),建立了EPEC的DPO-PCR快速检测方法。结果显示,退火温度在45℃~
【机 构】
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海南出入境检验检疫局检验检疫技术中心,黑龙江出入境检验检疫局检验检疫技术中心,从化出入境检验检疫局,沈阳农业大学食品学院,东北农业大学动物医学学院
【基金项目】
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海南省自然科学基金项目(310106,314174), 国家质检总局科技项目(2013IK031,2013IK051), 海南省应用技术研究与开发专项项目(ZDXM20130025), 海南省社会发展科技专项(2015SF29), 广东检验检疫局科技计划项目(2011GDK44,2013GDK04)
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为建立肠致病性大肠杆菌(EPEC)的快速检测方法,本研究以EPEC bfp A基因为靶基因设计了一对双启动寡核苷酸引物(DPO),建立了EPEC的DPO-PCR快速检测方法。结果显示,退火温度在45℃~65℃范围内均能够高效地扩增出目的基因,表明DPO引物对退火温度不敏感。该方法对其他菌株的扩增结果均为阴性,特异性强;其灵敏度为97 cfu/m L。利用该方法和国标法分别对采集的230份临床样品进行检测,均共计检出5份EPEC阳性样品,两者符合率为100%。本研究建立的DPO-PCR方法设计简单、特异性强
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