原代乳鼠心肌细胞培养方法的改进

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目的

通过对传统乳鼠心肌细胞体外培养的条件、方法进行改进,得到纯度高、活力好、结构功能完整的心肌细胞。

方法

改进心室肌组织剪切方法,分别用胰酶、Ⅱ型胶原酶依次消化分离心肌组织,严格要求所需溶液pH值,差速贴壁法和化学抑制法相结合纯化心肌细胞。

结果

心肌细胞12 h后开始贴壁生长,24 h出现单个细胞自发性搏动,48 h部分心肌细胞间形成交联,72 h心肌细胞黏合成簇,96 h后细胞伪足相互接触交织成密集的网,形成放射状排列的细胞簇,可见岛屿样搏动。细胞存活率、纯度均达98%以上。

结论

此种方法培养的心肌细胞纯度高、活力好、结构及功能完整,是一种可靠的原代乳鼠心肌细胞培养方法。

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