【摘 要】
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目的 探讨脂联素(APN)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的小鼠心脏成纤维细胞(CF)增殖及ERK1/2信号的影响.方法 取日龄1～3 d的C57乳鼠心室肌组织,采用冷胰酶联合Ⅰ型胶原酶消化法分离细胞,贴壁差速法获得纯化小鼠CF,用形态学及免疫细胞化学技术进行鉴定.取2～4代CF随机分为5组,对照组用无血清的DMEM培养基培养;AngⅡ组用含1×10-7 mol/L AngⅡ的DMEM培养基培养;APN低、中、高剂量组先分别用1、5、25μg/mL APN干预1 h,然后加含1×10-7 mol/L Ang
【机 构】
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山东第一医科大学第二附属医院心脏中心,山东泰安271000;山东第一医科大学研究生部
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目的 探讨脂联素(APN)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的小鼠心脏成纤维细胞(CF)增殖及ERK1/2信号的影响.方法 取日龄1～3 d的C57乳鼠心室肌组织,采用冷胰酶联合Ⅰ型胶原酶消化法分离细胞,贴壁差速法获得纯化小鼠CF,用形态学及免疫细胞化学技术进行鉴定.取2～4代CF随机分为5组,对照组用无血清的DMEM培养基培养;AngⅡ组用含1×10-7 mol/L AngⅡ的DMEM培养基培养;APN低、中、高剂量组先分别用1、5、25μg/mL APN干预1 h,然后加含1×10-7 mol/L AngⅡ的DMEM培养基培养.均培养24 h后收集细胞.用MTT法检测CF增殖能力(OD值);用Western blotting法检测CF内细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)、磷酸化的细胞外调节蛋白激酶1/2(p-ERK1/2)蛋白表达,并计算p-ERK/ERK.结果 成功分离小鼠心脏CF,经鉴定细胞纯度接近100％.与对照组比较,AngⅡ组OD值高(P0.05);与对照组比较,AngⅡ组p-ERK蛋白相对表达量、p-ERK/ERK高(P均<0.05);与AngⅡ组比较,APN高剂量组p-ERK蛋白相对表达量、p-ERK/ERK低(P均<0.05).结论 脂联素可抑制AngⅡ诱导的小鼠心脏CF增殖及ERK1/2信号激活.
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