【摘 要】
：
目的构建带Myc标签的细胞周期蛋白依赖性激酶7(cyclin-dependent kinase 7,CDK7)的真核表达载体,获得其表达产物,并验证该激酶与已知相互作用蛋白P53之间的相互作用。方法应
【机 构】
：
军事医学科学院生物工程研究所; 解放军总医院骨科;
【基金项目】
：
国家自然科学基金资助项目(31100604,81101387);北京市自然科学基金资助项目(7132155)
论文部分内容阅读
目的构建带Myc标签的细胞周期蛋白依赖性激酶7(cyclin-dependent kinase 7,CDK7)的真核表达载体,获得其表达产物,并验证该激酶与已知相互作用蛋白P53之间的相互作用。方法应用PCR技术从人乳腺文库中扩增出CDK7全长编码区基因,将其克隆到p XJ-40载体中;继而重组质粒转染人胚肾293T细胞,以SDS-PAGE和Western印迹鉴定表达情况;免疫共沉淀检测Myc-CDK7与FLAG-p53的相互作用。结果双酶切和基因测序鉴定显示,Myc-CDK7真核表达质粒克隆构建成功;SDS-PAGE和Western印迹结果表明,Myc-CDK7转染人胚肾293T细胞后成功表达;免疫共沉淀显示,重组Myc-CDK7与已知相互作用蛋白P53在蛋白质水平上具有相互作用,证实其具有生物学活性。结论成功构建Myc-CDK7的真核表达载体,为进一步探讨Myc-CDK7对细胞周期的调控奠定了实验基础。
其他文献
本文将改革开放40年来的传媒产业发展分为三个阶段,梳理在传媒生态、媒体业态、媒介形态方面发生的传媒观念变迁,给传媒产业发展带来的影响。媒体应认真总结历史经验,把握好
<正>艾灸中有一种方法叫扶阳灸,可以说是保健灸的起源。第一个提出扶阳灸的人叫窦材,他是一个道医。道家的人讲究人的阳气要旺盛,"阳气若盛千年壮,阴气若强必毖伤"。阳气指的
我国师范大学承担着教师教育的主要任务，教育学院作为师范大学的特色组织，在教师教育方面也承担着重要责任，教育学院院长作为学院的主要负责人，其角色扮演的成功与否对教育学院乃
文章阐述了场所文脉与历史城镇关系,对凤凰古镇重要场所的特色与保护进行分析,并提出可通过对空间与社会支撑系统的规划,使历史城镇场所文脉得以保护和延续的研究理论与方法
目的了解孕妇产前的情绪波动状况,为其心理辅导、实施精神助产提供科学依据。方法应用焦虑自评量表(SAS)和抑郁自评量表(SDS),对我院2006年上半年来院就诊的孕35周以上的产前
本文介绍了美国中学研究性学习教材的课题研究,使我们对美国中学教材、教师、学生三位一体的科学探究学习的内容和方式有所了解,对我国基础教育课程改革中顺应国际潮流和坚持
筒仓在以煤为原料的煤化工工程的输煤系统中可用来代替露天煤场及半封闭干煤棚贮煤,在工程中的应用逐年增加。根据煤的物化特性,对大型煤筒仓除考虑筒仓本身的结构形式外,对
本文综述了体外受精-胚胎移植术后先兆流产患者焦虑情绪产生的原因和影响,并总结了国内外对体外受精-胚胎移植术后先兆流产患者焦虑情绪的心理干预方法,结合心理和生理的描述
目的探讨贫困大学生认知情绪调节与社会支持水平之间的关系。方法随机选取500名大学生施测社会支持量表和认知情绪调节量表。结果①贫困与非贫困大学生在自责、容忍和灾难化
本文从生态批评的角度,对《老人与海》进行解析,分析人与自然、人与社会、人与人之间的关系。海明威在《老人与海》中通过描写老渔夫圣地亚哥对待生活的态度、以及他与大海和