【摘 要】
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目的 评价仪器本身性能对PCR检测结果的影响.方法 使用不同厂家和不同型号的PCR仪,选取特定基因片段进行扩增实验,通过人为调整PCR仪的设定温度,探究PCR仪温度准确性,样品分别置于仪器上可能出现温度差异的位置进行扩增,探究PCR仪温度均一性,并探究恒温时间对扩增结果的影响.结果 当反应程序整体温度调高或降低1～2℃时,PCR仪检测弱阳性样本循环阈值(cycle threshold,Ct)值有极显著性差异(P<0.01).实验过程中恒温时间达不到设定要求,扩增结果会出现极显著性差异(P<0.01),甚至
【机 构】
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中国合格评定国家认可委员会, 北京 100062;中国海关科学技术研究中心, 北京 100026
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目的 评价仪器本身性能对PCR检测结果的影响.方法 使用不同厂家和不同型号的PCR仪,选取特定基因片段进行扩增实验,通过人为调整PCR仪的设定温度,探究PCR仪温度准确性,样品分别置于仪器上可能出现温度差异的位置进行扩增,探究PCR仪温度均一性,并探究恒温时间对扩增结果的影响.结果 当反应程序整体温度调高或降低1～2℃时,PCR仪检测弱阳性样本循环阈值(cycle threshold,Ct)值有极显著性差异(P<0.01).实验过程中恒温时间达不到设定要求,扩增结果会出现极显著性差异(P<0.01),甚至造成扩增失败.结论 研究结果提示实验室应通过PCR校准和检测过程的质量控制,确保检测结果的质量.
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目的 利用在线固相萃取液相色谱-串联质谱技术建立猪肉、火腿和腊肉中敌敌畏和敌百虫的同时检测方法.方法 样品中的目标化合物经50％乙腈水溶液提取,上清液用水稀释后经HP XBridgeTM C8柱富集,BEH C18色谱柱分离,甲醇和水梯度洗脱,三重四极杆质谱电喷雾正离子模式下采集数据,基质匹配外标曲线法定量.结果 敌敌畏和敌百虫的线性范围为0.2～50.0μg/kg,相关系数r2>0.99;猪肉、火腿和腊肉中敌敌畏的定量限分别为0.2、0.2和0.5μg/kg,敌百虫的定量限分别为0.5、0.5和1.0μ
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