大鼠Occludin基因克隆及其在肺泡Ⅱ型上皮细胞中的表达

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目的克隆大鼠紧密连接蛋白Occludin基因,构建哺乳动物表达载体。为进一步研究该基因的功能提供手段。方法采用RT—PCR法克隆大鼠Occludin基因编码序列,定向克隆法构建该基因哺乳动物表达载体。脂质体介导该载体转染人肺泡Ⅱ型上皮A549细胞,Western—blot法检测Occludin蛋白表达。结果成功克隆Occludin基因,构建pCMV—Occ哺乳动物表达载体并在A549细胞中表达。结论pCMV-Occ载体可介导Occludin基因在人肺Ⅱ型上皮A549细胞中表达。
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