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摘要：文章利用液相色谱法对油性食品中苯并（α）芘进行测定分析，采用弗罗里硅土柱固相萃取柱净化样品，建立了高效液相色谱荧光法测定食品中苯并（α）芘的方法。样品以环己烷为提取剂，净化、蒸发浓缩后用流动相溶解，测定结果证实可靠，有应用价值。
关键词：油性食品 苯并（α）芘 液相色谱法
中图分类号：TS207.3；O657.72 文献标识码：A 文章编号：1672-5336（2015）06-0000-00
1 实验准备
1.1 实验材料
实验过程中所选择的油性食品分析样本包括猪肉以及橄榄油两个部分，均采集于XX地区农贸市场。实验所需的试剂包括：色谱级乙醇试剂，色谱级乙腈试剂，优纯级氢氧化钾；弗罗里硅土小柱，苯并（α）芘标准品（浓度为12.0mg/ml），环已烷，氢氧化钾乙醇水溶液（剂量为1.0mol/L），标准储备液（剂量为1.0mg/L），苯并（α）芘标准工作液（浓度为0.5mg/ml），超纯水，一级水。
1.2 实验仪器
实验过程中所需的仪器设备包括：高效液相色谱分析仪（配合荧光检测器），T25均质器，涡旋振荡器，氮吹仪，固相萃取仪，离心机。
1.3 样品处理
将猪肉、橄榄油可食用部分切碎，充分混合均匀，密封后置入-18.0℃环境下冷冻储存备用。提取方法为：称取2.0g剂量混合试样，加入氢氧化钾乙醇溶液10.0ml剂量，使其达到均质状态，持续时间2.0min。在温度为80.0℃环境下水浴，皂化处理，持续时间为3.0h。自然冷却至室温状态，然后加入10.0ml剂量超纯水，充分混合均匀后，加入15.0ml剂量环已烷，在涡旋混合器上进行处理，混合时间为2.0min，然后做离心处理，离心处理条件为4000.0r/min，持续时间为3.0min，离心处理后转移上层清液。将10.0ml剂量环已烷加入混合样品中，重复上述操作，将两次离心处理后的提取液合并，使用氮吹仪操作，控制剂量在3.0ml～5.0ml范围内，保留浓缩溶液。净化处理选择弗罗里硅土柱进行净化，使用前通过6.0ml剂量环已烷进行湿润活化，将浓缩液移入弗罗里硅土柱内，收集流出液，然后使用6.0ml剂量环已烷对弗罗里硅土柱进行淋洗，将收集滤液合并并浓缩，使用1.0ml剂量乙腈试剂对浓缩液进行溶解，以0.45um微孔滤膜进行滤过处理。
2 实验方法
2.1 方法学验证
在按照上述色谱条件对样品进行液相色谱分析的过程当中，将进样浓度作为横向坐标，将峰面积作为纵向坐标，对苯并（α）芘标准曲线所对应的回归方程以及线性范围进行计算分析。
2.2 回收率与精密度实验
将不含有苯并（α）芘成分的样品作为反应基质，10倍状态下测定低限，100倍状态下测定低限水平并添加回收实验，重复实验次数为10次，取均值作为最终结果。
3 实验结果
3.1 方法学验证结果
以浓度0.5ng/ml苯并（α）芘标准品色谱分析为例，苯并（α）芘标准品色谱图如下图所示（见图1）。根据色谱图数据进行线性探究实验，对应线性方程为“y=1.70e+0.05x-1.25e+0.04”，相关性系数R?取值为0.9995（P<0.05）。
图1：浓度0.5ng/ml苯并（α）芘标准品色谱分析图 图2：的苯并（α）芘标准工作曲线图
该状态下所对应的苯并（α）芘标准工作曲线如下图所示（见图2），结合图2来看，当苯并（α）芘浓度控制在0.01ng/ml～10.0ng/ml范围内的情况下，标准工作曲线中峰面积与浓度之间具有良好的线性相关关系。
3.2 方法回收率与精密度结果
下表（如表1所示），为猪肉、橄榄油在液相色谱检测条件下所对应的苯并（α）芘回收率、精密度数据结果。根据表1中数据来看，猪肉、橄榄油添加浓度在1.0ug/kg～100.0ug/kg范围内时，回收率范围取值在81.3%～93.5%范围内，精密度取值在0.68%～3.40%范围内。
表1：猪肉、橄榄油苯并（α）芘回收率、精密度数据表
4 结语
对于植物源油性食品而言，样品基质洁净度好的，样品分析前处理方法比较简单，通常不需要皂化处理，但对于动物源油性食品而言，由于样品基质中成分复杂，存在多种可溶性蛋白质，因此前处理效果将直接对检测结果的判定水平产生影响。本次研究中，对猪肉（动物源油性食品）以及橄榄油（植物源油性食品）基质进行皂化处理，去除了油脂类杂质，在此基础之上通过环已烷萃取提取，取得了满意的分析效果。
收稿日期：2015-03-16
作者简介：邱鹏昊（1988—），男，江苏南京人，本科，助理工程师，目前在江苏省食品药品监督检验研究院从事检验工作。
关键词：油性食品 苯并（α）芘 液相色谱法
中图分类号：TS207.3；O657.72 文献标识码：A 文章编号：1672-5336（2015）06-0000-00
1 实验准备
1.1 实验材料
实验过程中所选择的油性食品分析样本包括猪肉以及橄榄油两个部分，均采集于XX地区农贸市场。实验所需的试剂包括：色谱级乙醇试剂，色谱级乙腈试剂，优纯级氢氧化钾；弗罗里硅土小柱，苯并（α）芘标准品（浓度为12.0mg/ml），环已烷，氢氧化钾乙醇水溶液（剂量为1.0mol/L），标准储备液（剂量为1.0mg/L），苯并（α）芘标准工作液（浓度为0.5mg/ml），超纯水，一级水。
1.2 实验仪器
实验过程中所需的仪器设备包括：高效液相色谱分析仪（配合荧光检测器），T25均质器，涡旋振荡器，氮吹仪，固相萃取仪，离心机。
1.3 样品处理
将猪肉、橄榄油可食用部分切碎，充分混合均匀，密封后置入-18.0℃环境下冷冻储存备用。提取方法为：称取2.0g剂量混合试样，加入氢氧化钾乙醇溶液10.0ml剂量，使其达到均质状态，持续时间2.0min。在温度为80.0℃环境下水浴，皂化处理，持续时间为3.0h。自然冷却至室温状态，然后加入10.0ml剂量超纯水，充分混合均匀后，加入15.0ml剂量环已烷，在涡旋混合器上进行处理，混合时间为2.0min，然后做离心处理，离心处理条件为4000.0r/min，持续时间为3.0min，离心处理后转移上层清液。将10.0ml剂量环已烷加入混合样品中，重复上述操作，将两次离心处理后的提取液合并，使用氮吹仪操作，控制剂量在3.0ml～5.0ml范围内，保留浓缩溶液。净化处理选择弗罗里硅土柱进行净化，使用前通过6.0ml剂量环已烷进行湿润活化，将浓缩液移入弗罗里硅土柱内，收集流出液，然后使用6.0ml剂量环已烷对弗罗里硅土柱进行淋洗，将收集滤液合并并浓缩，使用1.0ml剂量乙腈试剂对浓缩液进行溶解，以0.45um微孔滤膜进行滤过处理。
2 实验方法
2.1 方法学验证
在按照上述色谱条件对样品进行液相色谱分析的过程当中，将进样浓度作为横向坐标，将峰面积作为纵向坐标，对苯并（α）芘标准曲线所对应的回归方程以及线性范围进行计算分析。
2.2 回收率与精密度实验
将不含有苯并（α）芘成分的样品作为反应基质，10倍状态下测定低限，100倍状态下测定低限水平并添加回收实验，重复实验次数为10次，取均值作为最终结果。
3 实验结果
3.1 方法学验证结果
以浓度0.5ng/ml苯并（α）芘标准品色谱分析为例，苯并（α）芘标准品色谱图如下图所示（见图1）。根据色谱图数据进行线性探究实验，对应线性方程为“y=1.70e+0.05x-1.25e+0.04”，相关性系数R?取值为0.9995（P<0.05）。
图1：浓度0.5ng/ml苯并（α）芘标准品色谱分析图 图2：的苯并（α）芘标准工作曲线图
该状态下所对应的苯并（α）芘标准工作曲线如下图所示（见图2），结合图2来看，当苯并（α）芘浓度控制在0.01ng/ml～10.0ng/ml范围内的情况下，标准工作曲线中峰面积与浓度之间具有良好的线性相关关系。
3.2 方法回收率与精密度结果
下表（如表1所示），为猪肉、橄榄油在液相色谱检测条件下所对应的苯并（α）芘回收率、精密度数据结果。根据表1中数据来看，猪肉、橄榄油添加浓度在1.0ug/kg～100.0ug/kg范围内时，回收率范围取值在81.3%～93.5%范围内，精密度取值在0.68%～3.40%范围内。
表1：猪肉、橄榄油苯并（α）芘回收率、精密度数据表
4 结语
对于植物源油性食品而言，样品基质洁净度好的，样品分析前处理方法比较简单，通常不需要皂化处理，但对于动物源油性食品而言，由于样品基质中成分复杂，存在多种可溶性蛋白质，因此前处理效果将直接对检测结果的判定水平产生影响。本次研究中，对猪肉（动物源油性食品）以及橄榄油（植物源油性食品）基质进行皂化处理，去除了油脂类杂质，在此基础之上通过环已烷萃取提取，取得了满意的分析效果。
收稿日期：2015-03-16
作者简介：邱鹏昊（1988—），男，江苏南京人，本科，助理工程师，目前在江苏省食品药品监督检验研究院从事检验工作。