【摘 要】
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目的 研究核桃去皮脱脂粉水提物(DDWPAE)的神经营养作用,进一步确定具体起活性的成分.方法 核桃去皮,石油醚脱脂后的脱脂粉超声水提的水溶液作为原材料,以人神经母细胞瘤细胞
【机 构】
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浙江农林大学林业与生物技术学院亚热带森林培育国家重点实验室,临安,311300
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目的 研究核桃去皮脱脂粉水提物(DDWPAE)的神经营养作用,进一步确定具体起活性的成分.方法 核桃去皮,石油醚脱脂后的脱脂粉超声水提的水溶液作为原材料,以人神经母细胞瘤细胞株(SH-SY5Y)为实验模型进行体外活性实验.MTT检测DDWPAE毒性,不同浓度DDWPAE处理细胞,ImageJ测量突触增长情况,以神经元细胞骨架的主要成分神经丝蛋白为检测目的蛋白,荧光定量PCR检测NF160 mRNA表达,Western Blot检测NF160蛋白表达.HPLC分析DDWPAE成分,中压半制备收集主要成分并进行细胞活性实验.结果 核桃去皮脱脂水提物能促进SH-SY5Y细胞突触增长,在终浓度为5 mg/ml时作用最好,NF160基因表达及蛋白表达结果与细胞活性一致.MTT实验结果显示DDWPAE中主要成分均没有明显细胞毒性,细胞活性实验结果表明水提物主要成分中胞苷,尿苷,尿苷有促进细胞突触增长活性,分别在20,2,0.8 μg/ml终浓度处作用显著.但腺苷及5号峰成分(tR=37.5min)没有此活性.结论 核桃去皮脱脂粉水提物有促进神经细胞突触增长的活性,水提物主要成分中胞苷,尿苷,尿苷有促进细胞突触增长活性,但腺苷与5号峰成分无此活性.
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