丙型肝炎病毒基因组C区、NS3区、NS4区基因的融合、表达及初步应用

• 作 者: 沈小川 李铭 吴祥甫
• 机 构: 中国科学院上海生物化学研究所,,中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所,
• 出 处: 生物工程学报
• 发表日期: 2004年期
• 关键词: 丙型肝炎病毒 融合蛋白

通过PCR技术从HCV全长基因组中扩增并克隆到Core区、NS4区的部分优势表面抗原肽的基因和C33a基因.再将它们以Core、CC3c、NS4的顺序和C33c、NS4的顺序分别拼接融合成融合抗原CCN、CN.片段之间以-Gly-Gly-Gly-Gly-柔性连接肽连接.经核苷酸序列分析表明,拼接点序列正确.将融合抗原CN、CCN基因分别克隆至T7启动子控制下的表达质粒PET-24(a)+、PET-22(b)+中,转化至大肠杆菌BL21(DE3)后,经IPTG诱导可高表达分子量约为43kD、58kD的融合抗原,表达产物以包涵体形式存在.表达产物经Ni2+-IDA亲和柱纯化后,并对融合抗原CN、CCN的抗原性做了初步的鉴定.