表达翻转重组酶的真核载体的构建

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目的构建表达翻转重组酶(FLP)重组表达的真核载体。方法以质粒pFRT为模板,用聚合酶链反应(PCR)扩增出两端包含了Xbal和BamHI内切酶识别位点的全长FLP基因片段,将该片段插入用NheI和BamHI双酶切后的载体质粒pBK—CMV上,构建出重组质粒pBK—CMV—FLP。经过转化、挑选菌落,PCR鉴定且测序均正确。结果成功构建重组质粒pBK—CMV—FLP。结论构建好的pBK—CMV—FLP质粒为生物工程上删除筛选标记物提供了良好的条件。
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