尿激酶原cDNA在中国仓鼠卵巢细胞中的高效表达(Ⅰ)

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借鉴基因表达调控理论的研究结果和作者多年来对高效表达的研究经验,自行设计和构建了一个适合在哺乳动物细胞中高效表达外源基因的新型载体。将插入尿激酶原(pro—UK)cDNA的这一表达载体用磷酸钙共沉淀法转染CHO—dhfr~-细胞,经一系列筛选、MTX加压扩增、亚克隆和锌离子诱导,获得了高效表达尿激酶型纤溶酶原激活物(u-PA)的细胞株,表达水平达800~1500IU/(10~6细胞·d)。 With reference to the research results of gene expression regulation theory and the author’s research experience of high expression for many years, a novel vector suitable for efficient expression of foreign genes in mammalian cells was designed and constructed. This prokaryotic expression vector containing pro-UK cDNA was transfected into CHO-dhfr ~ - cells by calcium phosphate co-precipitation and subjected to a series of screening, MTX pressurized amplification, subcloning and zinc ion induction to obtain The expression level of urokinase-type plasminogen activator (u-PA) was 800-1500 IU / (10-6 cells · d).
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