【摘 要】
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目的 结合冈田绕眼果蝇转录组数据库筛选高效氯氰菊酯胁迫作用后差异表达cyp9f2基因,并对其基因序列及编码蛋白质的结构和功能进行分析.方法 利用生物信息软件分析预测cyp9f2
【机 构】
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遵义医科大学寄生虫学教研室,贵州遵义563003;贵州省基因检测与治疗特色重点实验室;黔南民族医学高等专科学校;遵义医科大学寄生虫学教研室,贵州遵义563003;贵州省基因检测与治疗特色重点实验室;黔
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目的 结合冈田绕眼果蝇转录组数据库筛选高效氯氰菊酯胁迫作用后差异表达cyp9f2基因,并对其基因序列及编码蛋白质的结构和功能进行分析.方法 利用生物信息软件分析预测cyp9f2基因序列及其编码蛋白质的理化性质和亲疏水性等;采用昆虫杆状病毒表达系统对合成的cyp9f2基因编码区进行克隆、表达,对表达产物进行Western blot和间接免疫荧光试验.结果 预测cyp9f2基因开放阅读框长1 542 bp,编码513个氨基酸;系统进化分析显示,冈田绕眼果蝇cyp9f2氨基酸序列与铃木果蝇(Drosophila suzukii)同源性为71.14％,与大部分果蝇科果蝇氨基酸序列同源性在65％～71％.构建重组杆状病毒Bacmid(pFast-bacl-cyp9f2)后转染sf9细胞,Western blot检测到61 ku目的蛋白;间接免疫荧光定位显示CYP9f2蛋白主要在细胞质中表达.结论 克隆的cyp9f2基因表达61 ku目的蛋白,且该蛋白主要存在于转染sf9细胞的细胞质中,这为田绕眼果蝇cyp9f2基因的药物代谢分子机制研究和结膜吸吮线虫媒介防制研究奠定了基础.
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