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为了研究3-磷酸甘油醛脱氧酶(GAPDH)化生物学功能,以pcDNA3.1-GAPDH质粒为模板.PCR方法扩增删PDtt基因,经BomHI和SalI双酶切后插入相同酶切的pET32a(+)载体,构建His—GAPDH融合蛋白表达质粒pET32a(+)-GAPDH;转化JM109感受态细胞,并进行阳性克隆筛选,扩增目的质粒;转化大肠杆菌BL21菌株,经IPTG诱导产生融合蛋白,亲和层析柱纯化后,用SDS—PAGE和Western blotting检测GAPDH蛋白表达情况。结果表明,构建的人GAPDH基因