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目的
了解IER5蛋白经放射损伤后的表达变化，并筛选IER5蛋白在放射损伤后可能参与DNA损伤修复通路中的相互作用蛋白。
方法HeLa细胞经4 Gy γ射线照射后在不同时间点收集细胞，提取总蛋白质和细胞核蛋白行Western blot检验；构建3×Flag标签融合表达的IER5蛋白表达载体，转染人肾上皮细胞293T并照射，收集细胞行免疫沉淀富集IER5的结合蛋白，十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离免疫共沉淀复合物，考马斯亮蓝染色观察差异条带并切胶酶解后行质谱分析，对可能相互作用蛋白结果进行Western blot验证。
结果IER5蛋白照后4 h表达逐渐增加，12 h至高峰，持续至48 h；细胞核内IER5蛋白表达也有增加趋势；质谱分析数据表明，照射组检测出374个蛋白，对照组检测出256个蛋白，两组比较差异蛋白41个，照射组中包括与DNA结合、代谢、损伤修复相关的10个蛋白；其中，与DNA损伤修复密切相关的1型聚ADP核糖基化聚合酶(PARP1)得到Western blot验证。
结论IER5是放射损伤相关蛋白，其可能参与DNA损伤修复通路。